JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:54 dk. • July 8th, 2025
Candida tropicalis mantarını içeren bir mikroplaka alın.
Hücreler, Msb2 adı verilen bir transmembran glikoproteini parçalayan ve inhibitör alanını ortadan kaldıran proteolitik bir enzim olan Sap2'yi salgılar.
Bu, mantarın dibe yapışmasına ve maya ve filamentli formlardan oluşan bir mikro koloniye dönüşmesine neden olur. Hücreler çözünür bileşenler ve biyopolimerler salgılayarak biyofilm oluşumunu başlatır.
Seçilen oyuklara Sap2'ye özgü antikorlar içeren bir serum örneği ekleyin ve karanlıkta inkübe edin.
Antikorlar Sap2'ye bağlanır ve aktivitesini nötralize eder, hücre canlılığını ve biyofilm olgunlaşmasını engeller.
Tedavi edilmemiş kuyularda, biyofilm yoğun bir hücre ağına ve hücre dışı matrise olgunlaşır.
Sıvıyı aspire edin, biyofilmi yıkayın ve plakayı havayla kurutun. Kromojenik bir substrat ekleyin ve karanlıkta inkübe edin.
Membrana bağlı oksidoredüktazları kullanan canlı hücreler, substratı renkli bir ürüne indirger.
Renkli süpernatanı aktarın ve emilimi okuyun.
Serumla muamele edilen kuyucuklarda daha düşük bir absorbans, antikor aracılı biyofilm inhibisyonunu gösterir.
Steril RPMI1640 MOPS ortamında ısıyla inaktive edilmiş serum örneklerinin seri dilüsyonlarını hazırlayın
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin