Tümörlere Bispesifik Antikor Kaynaklı T Hücresi Trafiğini İzlemek için İn Vivo Bir Teknik
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 2:44 dk. • July 8th, 2025
Tümörle ilişkili bir antijeni veya TAA'yı aşırı eksprese eden deri altı tümör ksenogrefti taşıyan anestezi uygulanmış, bağışıklığı baskılanmış bir fareyi ele alalım.
Lusiferaz enzimini eksprese eden efektör T hücrelerini retroorbital olarak enjekte edin.
Sitokin destekleyici bir efektör olan interlökin 2'yi deri altından uygulayın T hücresi sağkalımı.
Retroorbital olarak, T ve tümör hücreleri için bağlanma bölgeleri içerecek şekilde tasarlanmış bispesifik antikorları enjekte edin. Farenin iyileşmesine izin verin.
Antikorlar ve T hücreleri dolaşım yoluyla tümöre ulaşır.
Antikorlar, T hücreleri üzerindeki CD3'e ve tümör hücreleri üzerindeki TAA'ya bağlanarak, efektör T hücrelerini, tümör hücrelerinde apoptozu başlatan toksinleri serbest bırakmaya ve tümöre daha fazla T hücresi toplayan kemokinleri serbest bırakmaya teşvik eder.
Fareyi uyuşturun, retroorbital olarak bir lusiferaz substratı enjekte edin ve in vivo görüntülemeye devam edin.
T hücrelerinin içindeki lusiferaz, substratı oksitleyerek biyolüminesans yayar.
Zaman içindeki biyolüminesansı gözlemleyin. Sinyalin büyüklüğü, tümör içindeki T hücresi infiltrasyonunun derecesi ile ilişkilidir.
Fareyi 26 gauge bir iğne kullanarak uy
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin