JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:18 dk. • July 8th, 2025
Farklı farklılaşma aşamalarında nöronal progenitörlerden oluşan bir nörojenez bölgesi olan hipokampal dentat girustan oluşan bir murin beyin bölümünü ele alalım.
Kesiti geçirgenliği engelleyen bir çözeltiye aktarın. Çözeltideki deterjan molekülleri hücrelere nüfuz ederken, proteinler spesifik olmayan bağlanma bölgelerini bloke eder.
Spesifik nörojenez belirteçlerini, mikrotübül ile ilişkili bir proteini ve bir ara filament proteinini hedefleyen bir birincil antikor kokteyli ekleyin.
Bağlanmamış antikorları çıkarın. Primer antikorlara bağlanan farklı florofor etiketli sekonder antikorları tanıtın.
Birincil antikorlardan biriyle aynı konakçıdan serum proteinleri ekleyin ve ikincil antikorlar üzerindeki paratopları doyurun.
Serum proteinlerinin epitoplarını doyuran ve spesifik olmayan bağlanmayı önleyen monovalent Fab fragmanlarını tanıtın.
Başka bir ara filament proteinine bağlanan, aynı konak tarafından yükseltilen ikinci bir primer antikor ekleyin.
İkinci primer antikoru hedef alan florofor işaretli sekonder antikorları tanıtın.
Floresan mikroskobu kullanarak, benzersiz belirteç kombinasyonlarını ifade eden nöronal progenitör alt tiplerini tanımlayın.
Antifriz çözeltisinden bölümle
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin