JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 5:04 dk. • July 8th, 2025
Doku yapısını stabilize eden bir sodyum kakodilat tamponunda sabit bir kalp bölümünü yıkayarak başlayın. Membran lipitlerini lekelemek için bölümü osmiyum tetraoksit içine daldırın.
Boyama için optimum pH'ı korumak için sodyum asetat ile muamele edin.
Mikroskopi sırasında daha iyi kontrast sağlayan biyomolekülleri boyamak için uranil asetat ekleyin.
Dokuyu artan etanol konsantrasyonlarında ve ardından asetonla kurutun.
Dokuyu bir reçineye gömün, ultra ince kesitler elde edin ve bunları bir mikroskopi ızgarasına aktarın.
Hücresel proteinin maskesini kaldırarak osmiyum tetraoksiti çıkarmak için sodyum meta-periyodat ekleyin.
Bileşik ayrıca glikoproteini oksitleyerek glisin muamelesi ile nötralize edilen reaktif aldehit grupları oluşturur.
Spesifik olmayan antikor bağlanmasını önleyen bir bloke edici tampon ekleyin.
Hedef proteine özgü birincil antikorları ve ardından biyotinile edilmiş ikincil antikorları ekleyin.
Biotin'e bağlanan streptavidin konjuge kuantum noktaları ekleyin.
Bir elektron mikroskobu altında, kuantum nokta etiketli bölgeler daha yüksek kontrast sergiler ve hedef proteinin hassas hücre altı lokalizasyonuna yardımcı olur.
24 saatlik fiksasyondan sonra, dokuyu 0.1 mol
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin