JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:43 dk. • July 8th, 2025
Sabit bir fare böbreği alın. Dokudaki lipitler ışık saçılımına neden olur ve pigmentler ışık emilimine neden olarak hücreleri opak hale getirir.
Delipidasyon ve renk giderme için dokuyu CUBIC-L ile tedavi edin. CUBIC-L'deki amino alkol, lipitleri ve pigmentleri uzaklaştırarak ışık saçılmasını en aza indirir ve şeffaflığı artırır.
CUBIC-L'deki deterjan molekülleri de hücrelere nüfuz eder.
Sempatik sinirlerin nöronlarındaki sitoplazmik tirozin hidroksilaza ve damar düz kas hücrelerindeki alfa-düz kas aktinine bağlanan bir birincil antikor kokteyli tanıtın.
Birincil antikorlara bağlanan florofor işaretli ikincil antikorlar ekleyin.
Antikor tedavisini korumak için doku postfiksasyonu gerçekleştirin.
Dokuyu suyun yerini alan ve proteinlerin kırılma indisiyle eşleşen, ışık saçılmasını daha da en aza indiren ve şeffaflığı artıran CUBIC-R+'ya daldırın.
Işık tabakası floresan mikroskobu altında, ışık tabakaları dokuyu aydınlatır ve floroforları heyecanlandırır.
Floroforun yaydığı ışığı yakalayın ve böbrekteki atardamarların etrafındaki sempatik sinir dağılımını gösteren üç boyutlu bir görüntü oluşturun.
Başlamak için, perfüzyon fiksasyonundan ve böbrek örneklemesinden hemen sonra böbreği 16
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin