JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:09 dk. • July 8th, 2025
Bir Parkinson hastalığı hastasından alınan bir deri biyopsisinin kriyokesitini gömülü bir ortamda alın.
Doku, en dışta bir epidermis, altta yatan bir dermis ve sinirler tarafından innerve edilen deri altı yağdan oluşur.
Gömme ortamını çıkarmak için bölümü yıkayın. Hücrelere nüfuz ederek ve spesifik olmayan bağlanma bölgelerini bloke ederek geçirgenleştirme engelleme çözeltisine aktarın.
Serbest yüzen boyama olarak adlandırılan tek tip antikor etiketlemesi elde etmek için bölümü bir birincil antikor kokteyline daldırın.
Antikorlar nöronlara girer ve aksonlar boyunca dağıtılan alfa-sinüklein agregatlarına (nörodejeneratif hastalıkların karakteristik bir toplu formu) ve karboksil-terminal hidrolazlara bağlanır.
Primer antikorlara bağlanan florofor konjuge ikincil antikorları tanıtın.
Çekirdeği lekeleyen bir floresan DNA bağlayıcı boya ile muamele edin.
Dokuyu bir slayt üzerine yerleştirin, bir montaj ortamı uygulayın ve bir lamel ile kapatın.
Konfokal bir mikroskop altında, her iki antikordan gelen floresan, dermal nöronların aksonları boyunca alfa-sinüklein agregatlarının varlığını ortaya çıkarır.
Başlamak için, 96 oyuklu yeni bir plakanın bazı kuyularını 100 mikrolitre yıkama solüsy
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin