Basılı Glikan Dizisi ile Dolaşımdaki Anti-Glikan Antikorlarının Saptanması

Dizi blokları halinde düzenlenmiş basılı glikan alt dizileri içeren işlevselleştirilmiş bir glikoçip ile başlayın.

Alt dizideki her nokta, monosakkarit bileşimi, zincir uzunluğu ve dallanma modelinde varyasyonlara sahip karbonhidrat bazlı bir polimer olan farklı bir glikanı temsil eder.

Spesifik olmayan etkileşim bölgelerini bloke etmek için glikoçipi bir bloke edici tampon ile muamele edin.

Glikoçipi aktarın ve antikor agregasyonunu en aza indirmek için seyreltilmiş fare serumunu yüzey aktif madde takviyeli bir tampona ekleyin. Ajitasyon altında inkübe edin.

Ajitasyon, anti-glikan antikorlarının farklı moleküler özelliklere dayalı olarak spesifik glikanlara seçici bağlanmasını kolaylaştırarak üniform serum dağılımını teşvik eder.

Spesifik olmayan bağlanmayı bozmak için yüzey aktif madde içeren bir tamponun azalan konsantrasyonlarında yıkayın ve durulayın.

Glikoçipi, önceden bağlanmış anti-glikan antikorları ile etkileşime girerek, anti-fare biyotini ile konjuge ikincil antikorlarla kaplayın ve yıkayın.

Biyotinile edilmiş ikincil antikorlara bağlanan florofor etiketli streptavidin ekleyin. Fazla çözeltiyi yıkayın ve çıkarın.

Glikoçipi tarayın ve serumda glikana özgü dolaşımdaki ant