JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:38 dk. • July 8th, 2025
Farklı bitki dokularının ince kesitlerini içeren reaksiyon kuyuları ile bir slayt alın. Dokular sabitlenir ve immün boyama için bir reçine içine gömülür.
Sonraki adımlarda ışığa maruz kalmayı ve reaktif buharlaşmasını önlemek için slaytı karanlık ve nemli bir inkübasyon odasına yerleştirin.
Spesifik olmayan antikor etkileşimini önlemek için bir bloke edici çözelti tanıtın.
Fazla bloke edici solüsyonu çıkarmak için yıkayın, ardından antijene özgü primer antikorları ekleyin ve inkübe edin.
Antikorlar, hedef antijenlerine, yani hücre duvarındaki arabinogalaktan proteinlerine ve pektinlere bağlanır.
Primer antikorlara bağlanan florofor konjuge ikincil antikorları tanıtın.
Bağlanmamış antikorları çıkarmak için yıkayın ve selüloza bağlanan ve hücre duvarını etiketleyen bir floresan boya uygulayın.
Bir montaj ortamı ekleyin ve bir lamel ile kapatın.
Mikroskop altında, boyadan ve bağlı antikorlardan gelen floresan, arabinogalaktan proteinleri veya pektin ile kolokalize edilmiş bitki hücre duvarlarındaki selülozun görselleştirilmesine yardımcı olur ve dokuya özgü dağılımlarını sergiler.
Reaksiyon slaytları için bir inkübasyon odası hazırlamak için, pipet ucu kutusunun altına biraz nemli kağ
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin