JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:05 dk. • July 8th, 2025
Benzersiz antijenik bileşimler sergileyen hücre dışı veziküller veya EV'ler olarak adlandırılan hücreden türetilmiş zara bağlı parçacıkları taşıyan bir tüp ile başlayın.
Floresan etiketli Fab fragmanları ile konjuge edilmiş yakalama antikorları içeren manyetik nanopartikülleri, MNP'leri tanıtın.
MNP'ler arasındaki etkileşimi EV'lerin spesifik antijenleri ile kolaylaştırmak için inkübe edin ve MNP-EV kompleksleri oluşturun.
Fc bağlanma bölgelerini bloke etmek için immünoglobulin-G ekleyin, ardından yakalanan partiküller üzerindeki diğer antijenleri boyamak için floresan etiketli tespit antikorları ekleyin.
Bu karışımı, manyetik bir ayırıcıya yerleştirilmiş önceden yıkanmış bir manyetik kolona yükleyin.
Manyetik alan, MNP tarafından yakalanan parçacıkları sütun içinde tutar. Bağlanmamış antikorları çıkarmak için tamponu değiştirin.
Sütunu manyetik ayırıcıdan alın, MNP tarafından yakalanan parçacıkları bir tamponla elüte edin ve yapısal bütünlüklerini korumak için sabitleyin.
İmmün yakalanmış parçacıkları akış sitometrisi ile analiz edin; lekeli antijenlerden gelen farklı floresan sinyalleri, EV'lerin benzersiz antijenik özellikleri ile ilişkilidir.
Koşul başına 60 mikrolitre MNP ve i
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin