Çapraz Reaktivitesiz Çoklanmış Sandviç İmmünoassay için Bir Snap Chip Teknolojisi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:36 dk. • July 8th, 2025
Çoklu protein tespiti için proteine özgü yakalama antikorları içeren farklı noktalara sahip önceden işlenmiş bir mikrodizi tahlil slaydı monte ederek başlayın.
Protein standardının dilüsyonlarını ve önceden seyreltilmiş serum örneklerini ayrı kuyucuklara yükleyin. Bu seyreltmeler, doğru miktar tayini için bir dizi protein konsantrasyonu oluşturur.
Protein-antikor etkileşimlerini kolaylaştırmak için inkübe edin. Bağlanmamış proteinleri çıkarmak için yıkayın, slaytı sökün ve kurutun.
Tahlil slaytını, tahlil lamı ile aynı pozisyonlarda proteine özgü biyotinillenmiş tespit antikorları ile lekelenmiş yeniden sulandırılmış bir transfer lamı içeren bir çıtçıt aparatında ters çevirin.
Cihazı kapatın ve slaytları birbirinin üzerine oturtmak için bastırın. Bu, tespit antikorlarının tahlil lamı üzerindeki karşılık gelen noktalara transferini kolaylaştırır ve çapraz reaktiviteyi en aza indirir.
Tespit antikorlarının bağlı proteinlerle etkileşimine izin vermek için slaytları ayırın ve immünokompleksler oluşturun.
Tahlil slaytını yeniden birleştirin, durulayın ve biyotinile antikorlarla etkileşime giren florofor konjuge streptavidin ekleyin.
Bir tarayıcı kullanarak, serum örneğinde birden fazla
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin