JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 5:19 dk. • July 8th, 2025
Yapışmış konak hücreleri içeren bir slaytla başlayın.
Virüsleri ekleyin ve konakçı hücrelere girmelerine izin verin.
Harcanan ortamı çıkarın. Viral protein sentezini ve taşınmasını sağlamak için taze ortam ekleyin.
Hücre morfolojisini ve protein konumunu korumak için paraformaldehit kullanın.
Hücreleri geçirgen hale getirmek için deterjan molekülleri ekleyin.
Hedef olmayan bağlama sitelerini engellemek için bir engelleme arabelleği uygulayın.
Hedef viral proteinleri bağlayan birincil antikorları ekleyin. Bağlanmamış antikorları çıkarın.
Viral proteinleri floresan olarak etiketlemek için kırmızı florofor konjuge ikincil antikorlarla kaplayın. Bağlanmamış antikorları çıkarın.
Çekirdekleri boyamak için floresan nükleer boya içeren bir montaj ortamı ekleyin.
Konfokal mikroskopi kullanarak, kırmızı floresan viral proteinlerin ve mavi floresan konak çekirdeklerinin yerini gözlemleyin.
Mavi alanın etrafındaki daha güçlü bir kırmızı sinyal sitoplazmik lokalizasyonu gösterirken, iç kısımdaki daha güçlü bir sinyal nükleer lokalizasyonu gösterir.
Mavi alanın içindeki ve çevresindeki eşit sinyal seviyeleri, proteinlerin hem çekirdekte hem de sitoplazmada bulunduğunu gösterir.
Virüs enfeksiyonu
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin