Primaquin ve Fotodinamik Terapi ile Makrofaj Fagositik Etkinliğinin Ölçülmesi

Yapışmış murin makrofajları veya fagositik bağışıklık hücreleri içeren çok kuyucuklu bir plaka ile başlayın.

Makrofaj reseptörleri ile etkileşime giren ve fagositoz yoluyla içselleştiren Cryptococcus'un bir mantar hücresi süspansiyonunu tanıtın.

Fagozom lizozom ile birleşerek bir fagolizozom oluşturur. Fagolizomun asidik ortamı, mantarın hayatta kalmasını ve çoğalmasını destekler.

Test kuyucuklarına yüksek konsantrasyonda bir ışığa duyarlılaştırıcı olan primakin ekleyin, kontrol ise ışığa duyarlılaştırıcıdan yoksundur. Makrofajlar tarafından primakin alımını kolaylaştırmak için kuluçkaya yatırın.

Fotodinamik tedavi veya PDT için plakayı ultraviyole ışığa maruz bırakın.

Test kuyusunda, primakin, moleküler oksijen ile etkileşime giren, reaktif oksijen türleri veya ROS üreten radikal katyonlar oluşturur.

ROS mantar ölümüne neden olurken, makrofajların anti-oksidatif enzimleri ROS'u nötralize ederek hücresel hasarı önler.

Makrofajları geçirgen hale getirerek mantar hücrelerini serbest bırakır.

Seyreltilmiş hücre içeriğini seçici agar plakalarına yayın ve farklı mantar kolonileri elde edin.

Kontrole kıyasla test plakasında daha az koloni, primakin ile fotodinamik muameleye bağlı makrofa