JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:05 dk. • December 23rd, 2025
İnsan sitomegalovirüsü veya HCMV'ye özgü antikorların seri dilüsyonlarını alın.
HCMV eklendikten sonra, antikorlar viral zarf üzerindeki glikoprotein B'ye bağlanarak virüsü nötralize eder.
Karışımı insan fibroblastlarına aktarın ve inkübe edin.
Nötralize edilmemiş virüsler üzerindeki bir trimer glikoprotein kompleksi, spesifik hücresel reseptörlere bağlanarak glikoprotein B aracılı virüs-konak membran füzyonunu tetikler ve içindeki genomik DNA içeren nükleokapsidi serbest bırakır.
Serbest bırakılan genom çekirdeğe girer ve hemen erken erken veya IE proteinlerini kodlar.
Antikor nötralizasyonu, hücrelere viral girişi önler.
İçselleştirilmemiş virüsleri kaldırın. Hücreleri sabitlemek ve geçirgen hale getirmek için sıfırın altındaki bir sıcaklıkta etanol ile muamele edin.
IE proteinlerine bağlanan bir primer antikor tanıtın.
Birincil antikora bağlanan florofor konjuge bir ikincil antikor ve DNA'ya bağlanan bir floresan lekesi ekleyin.
Mikroskop altında, virüs bulaşmış çift lekeli hücreleri tespit edin. Farklı antikor konsantrasyonlarında virüs nötralizasyonunu belirlemek için enfekte olmuş hücrelerin yüzdesini hesaplayın.
Deneyden bir gün önce, steril 96 oyuklu bir plakada,% 10 FBS il
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin