JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 5:30 dk. • January 15th, 2026
Şiddetli akut solunum sendromu koronavirüs 2 veya SARS-CoV-2'ye karşı değişen konsantrasyonlarda nötralize edici antikorlar içeren seri olarak seyreltilmiş insan serumu ile başlayın.
SARS-CoV-2 spike proteinleri içeren bir lipid çift tabakası içinde kapsüllenmiş lusiferaz RNA, integraz ve ters transkriptaz ile psödotiplenmiş virüsleri tanıtın.
Antikorlar, serum seyreltmesine dayalı olarak virüsleri nötralize eder, daha düşük seyreltmeler maksimum nötralizasyon gösterir.
Anjiyotensin dönüştürücü enzim-2 reseptörlerini veya ACE2 reseptörlerini ve transmembran proteaz serin-2 veya TMPRSS2 eksprese eden hedef hücreleri tanıtın.
Daha yüksek serum dilüsyonlarında, nötralize edilmemiş virüsler ACE2 reseptörleri ile etkileşime girerken, TMPRSS2 spike proteinini parçalayarak virüs füzyonunu sağlar.
Girişten sonra, lusiferaz RNA, konakçı genomuna entegre olan ve lusiferaz enzimi üreten DNA'ya ters kopyalanır.
Ortamı, lusiferaz substratı ve bir lizasyon maddesi içeren bir tahlil tamponu ile değiştirin.
Hücreler parçalanır, substrat ile etkileşime giren ve yüksek lüminesans üreten hücre içi lusiferaz salgılar.
Viral nötralizasyon yüzdesini belirlemek için serum seyreltmeleri boyunca lüminesans
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin