JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:51 dk. • July 8th, 2025
Bir test aşısı ile kaplanmış çok kuyulu bir plaka ile başlayın ve spesifik olmayan etkileşim bölgelerini bloke edin.
Test aşısı enjekte edilen bir fareden bir serum örneği alın.
Bu serum, test aşısını tanıyan immünoglobulin G veya IgG antikorları içerir.
Aşı kaplı kuyucuklara seri olarak seyreltilmiş serum örnekleri ekleyin.
IgG'ler aşıya bağlanır. Bağlanmamış antikorları çıkarmak için yıkayın.
IgG'lere bağlanan peroksidaz konjuge ikincil antikorları ekleyin. Bağlanmamış ikincil antikorları çıkarın.
Kromojenik bir substrat ekleyin. Peroksidaz, substrat ile etkileşime girerek mavi renkli bir ürün oluşturur.
Reaksiyonu durdurmak için bir asit ekleyin. PH'daki değişiklik çözeltiyi sarıya çevirir.
Bir spektrofotometre kullanarak, serum örneğindeki IgG konsantrasyonunu belirlemek için her bir oyuğun renk yoğunluğunu ölçün.
Enzime bağlı immünosorbent testinin veya ELISA plakasının antijen kaplaması için, HI protein antijenini kaplama çözeltisi ile mililitrede 10 mikrograma seyreltin ve ELISA plakasındaki oyuk başına 100 mikrolitre seyreltilmiş antijen ekleyin. Plakayı gece boyunca 4 santigrat derecede inkübe edin. İnkübasyondan sonra, plakayı kuyucuk başına 300 mikrolitre PBST ile yıkayı
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin