29 Mart 2013
Farelerde Deneysel miyokardiyal enfarktüs indüklemek için kullanılan cerrahi prosedür kalp ve akciğer sol ön yüzeyine görselleştirmek için üçüncü ve dördüncü kaburgalar arasındaki sol torakotomi ile başlar. Sol koroner arter ligasyonu olduğu, göğüs kapalı ve fare kendiliğinden kurtarmak için izin verilir.
Bu prosedürün genel amacı, farelerde miyokard enfarktüsü oluşturmaktır. Bu işlem, öncelikle orta aksiller hat boyunca bir cilt insizyonu yapılarak gerçekleştirilir. Ardından, üçüncü ve dördüncü kaburgalar arasından sol torakotomi yapılarak kalp açığa çıkarılır.
Ardından, sol ön inen arterin proksimal segmentine bir ligasyon yapılır. Son olarak göğüs kapatılır ve fare, kendiliğinden iyileşmesi için tekrar kafese yerleştirilir. Nihayetinde, miyokard enfarktüsü elektrokardiyografi veya ekokardiyografi yoluyla incelenebilir.
Sol koroner arterin yakın bölgesindeki ligasyonun öğrenilmesi zor olduğundan, bu yöntemin görsel gösterimi kritik öneme sahiptir. Ligasyonun sol arter ağzının hemen altına yerleştirilmesiyle yeterli miyokard enfarktüsü sağlanır. Ancak, ölümcül kanamaya neden olabileceği için sol atriumun delinmemesi önemlidir.
Cerrahi işleme başlamak için, altı haftalık veya daha yaşlı bir fareyi %2 ila %5 florin inhalasyonu ile anestezi altına alın. Hayvanın yeterince anestezi aldığını doğrulamak için ayak parmağı sıkıştırma testi uygulayın. Fare tamamen sedatize olduktan sonra, cerrahi alana taşıyın ve üzerine yerleştirin.
Fareyi sıcak bir ped üzerine yerleştirin. 37 °C'lik sabit bir sıcaklığı korumak için, fareyi 0,2 cm çapında bir tüp ve havada %2 isoflurane karışımı kullanan isoflurane alan kameralı bir entübasyon cihazına sabitleyin. Tüpü farenin trakeasına yerleştirin.
Prekordiyal göğsün sol tarafındaki tüyleri tıraş edin ve ardından bölgeyi Betadine ile dezenfekte edin. Daha sonra, alanı üç kez %75 etanol ile temizleyin. Ayrıca, steril makas kullanarak farenin gözlerine oftalmik pomad uygulayın.
Orta aksiller hat boyunca 1,5 santimetrelik bir insizyon yapın. Bu yaklaşım, sonraki ekokardiyografik değerlendirmeyi kolaylaştırır. Bu genç farelerde alttaki dokuların zarar görmesini önlemek için neşter yerine makas kullanılır.
Ardından, küt uçlu kap forcepsleri kullanarak prekordial kası göğüs duvarından ayırın ve geri çekin. Kalbin ön yüzeyini ve sol akciğeri görüntülemek için üçüncü ve dördüncü kaburgalar arasından sol torakotomi gerçekleştirin. Daha sonra, uygun bir göz kapağı retraktörü kullanarak göğüs duvarını geri çekin.
Dişleğen ve küt uçlu makas kullanarak görselleştirmeyi ve erişilebilirliği artırmak için perikardı çıkarın. Ardından, arterin bağlanması için yedi sıfır lon sütür ve iğne hazırlayın. Ligatür ile arter arasında bir miyokard bandı kalacak şekilde iğneyi arterin altına yerleştirerek sol koroner arteri bağlayın.
Üçüncü ve dördüncü kaburgalara iki dikiş atarak göğüs kafesini kapatın. İzofluran konsantrasyonunu %0,5'e düşürün ve cildi üç dikişle kapatmak için beş sıfır etilen sütür kullanın. Postoperatif analjezi için, kilogram başına 0,05 miligram buprenorfin intraperitoneal enjeksiyonu uygulayın.
Son olarak, fareyi spontan iyileşme için sıcak bir kafese yerleştirin ve içme suyuna mililitre başına 0,6 miligram buprenorphine ekleyin. Miyokard enfarktüsünün etkilerini incelemek için ameliyat sonrası ilk 24 saat boyunca fareyi yakından izleyin. En etkili invaziv yöntem, ameliyattan birkaç gün sonra ekokardiyografi ile kardiyak fonksiyonların değerlendirilmesidir.
Bu protokol kullanıldığında, sol koroner arterin ligasyonu, sol ventrikülün yaklaşık %40'ını etkileyen bir miyokardiyal iskemiye yol açar. Bu durum, ligasyon öncesi ve sonrası ölçülen bu temsili EKG'lerde görüldüğü üzere, ST segmentinde belirgin EKG değişiklikleri meydana getirir. Miyokard enfarktüsü öncesi.
EKG ile kaydedilen QRS kompleksleri dar ve kısadır. Miyokard enfarktüsü sonrası, QRS komplekslerinin içine gömülerek QRS'yi miyokard enfarktüsü öncesinde kaydedilenlerden çok daha geniş ve yüksek hale getiren belirgin bir ST segment yükselmesi görülür. Miyokard enfarktüsünün etkilerini araştırmak için, MI operasyonundan birkaç gün sonra ekokardiyografi ile kardiyak fonksiyonu değerlendirin.
Burada, sham operasyon uygulanan farelerden alınan bir ekokardiyografi kaydı gösterilmektedir. Sham operasyon uygulanan farelerde görülen iyi kalp kasılmalarının aksine, MI farelerinde.
MI'dan 72 saat sonra, sistolik aşamada sol serbest ventrikül duvarında belirgin akinezi görülmektedir. Bu videoyu izledikten sonra, miyokard enfarktüsüne yönelik bu fare modelini iyi kavramış olmalı ve bu modeli kendi laboratuvarınızda kurabilmelisiniz.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, sol torakotomi ve sol anterior descending arterin ligasyonunu içeren, farelerde miyokard enfarktüsü oluşturmaya yönelik cerrahi bir prosedürü tanımlamaktadır. Prosedürün ardından göğüs bölgesi kapatılır ve farenin kendiliğinden iyileşmesi beklenir.
Miyokard enfarktüsünün bu fare modeli, kardiyak patofizyolojinin ve terapötik müdahalelerin değerlendirilmesi için tekrarlanabilir bir preklinik sistem sunar. İnsan iskemik-reperfüzyon hasarını simüle ederek, kardiyovasküler ilaç keşfinde hedef doğrulamasına ve mekanizmal risk azaltımına olanak tanır. Model, erken aşama Ar-Ge süreçlerinde öncü bileşiklerin tanımlanmasını ve öngörü güvenini destekler.
Model, hedef doğrulamadan preklinik etkinlik testlerine kadar kardiyovasküler keşif iş akışlarına entegre olur.