JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:49 dk. • July 8th, 2025
Büyüme faktörü reseptörlerini ve bir floresan proteini eksprese eden hedef hücrelerden oluşan heterojen hücre agregatları olan asılı damla karışık sferoidlerin bir kültürünü ele alırken, hedef olmayan hücreler farklı renkli bir floresan proteini eksprese eder.
Ortamı, hedef hücreye özgü bir monoklonal antikor ve bir fotoemici boya içeren bir antikor-fotoemici konjugatı ile değiştirin.
Hedef hücre reseptörlerine antikor bağlanmasını kolaylaştırmak için inkübe edin.
Bağlanmamış konjugatları çıkarmak için sferoidleri ortamla yıkayın, ardından bunları hafif ışınlama için ortamlı cam tabanlı bir kaba aktarın.
Fotoimmünoterapi için sferoidleri yakın kızılötesi ışığa maruz bırakın, fotoemici boyanın hedef hücreler üzerinde fotokimyasal reaksiyonunu tetikleyerek hızlı hücresel zar hasarına ve hücre ölümüne neden olur.
Bu işlem, hedef olmayan hücrelere zarar vermeden hedef hücreleri ortadan kaldırır.
Sferoidleri yeni bir asılı damla plakasına aktarın. Ortam ekleyin ve küresel büyüme için inkübe edin.
Bir floresan mikroskobu altında, hedef hücre floresansının olmaması etkili hücre eliminasyonunu gösterirken, hedef olmayan hücre floresansının varlığı fotoimmünoterapinin seçici doğasını doğrul
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin