JoVE Encyclopedia of Experiments
İmmünoloji
0 görüntüleme • 2:26 dk • July 8th, 2025
Fonksiyonel bağışıklık hücreleri olarak sadece nötrofillere ve monositlere sahip bağışıklığı baskılanmış bir fareyi ele alalım.
İntraperitoneal olarak, immün progenitör hücreleri hedef alan bir ilaç olan siklofosfamid enjekte edin.
İlaç aktif olarak çoğalan immün progenitör hücrelere girer ve nükleik asitleri çapraz bağlayarak hücre ölümüne neden olur. Progenitör hücrelerin ölümü, bağışıklık hücresi tükenmesine yol açar.
Siklofosfamid ile bir eklenti oluşturan ve siklofosfamid kaynaklı yan etkileri azaltan bir ilaç olan disülfiram'ı oral yoldan uygulayın.
Uygun bir jelatinimsi protein karışımı içinde insan tümör hücreleri ve periferik kan mononükleer hücrelerinin veya PBMC'lerin bir karışımını deri altına enjekte edin.
Protein karışımı, fizyolojik hücre dışı matrisi taklit eden bir jel oluşturur ve tümör hücrelerini hapseder.
Fonksiyonel bağışıklık hücresi tükenmesi, tümör hücrelerinin çoğalmasına ve yeni kan damarları oluşturmasına izin vererek katı bir tümör ksenogreftine dönüşür.
Eşzamanlı olarak, enjekte edilen PBMC'lerden gelen T hücreleri tümöre sızar.
Tümör ksenogrefti, büyüme ve tümöre sızan T hücreleri sergileyerek insanlaştırılmış bir ksenogreft fare modeli oluşturur.
Miyeloid hücre tükenmesi için, intraperitoneal olarak kilogram siklofosfamid başına 100 miligram verin ve iki gün boyunca günde bir kez 6 ila 8 haftalık NOD / SCID dişi farelere kilogram disülfiram başına oral olarak 125 miligram verin. İkinci siklofosfamid ve disülfiram dozundan 24 saat sonra, 5 x 106 yeni izole edilmiş insan PBMC ve 2.5 x 106'yı yeniden askıya alın hayvan başına 200 mikrolitre PBS artı %50 matrijel içinde insan tümör hücre hattı hücreleri ve tüm hacmi deri altından her deney hayvanının sağ tarafına enjekte edin. Primer tümör hacmini 4 ila 6 hafta boyunca haftada 2 kez ölçün ve kaydedin.