JoVE Encyclopedia of Experiments
İmmünoloji
0 görüntüleme • 2:12 dk • July 8th, 2025
Mesane epitelinde ürotelyal tümörler taşıyan, sırtüstü pozisyonda anestezi uygulanmış bir dişi fare ile başlayın.
Arka ayakları sabitleyin, üretral açıklığı bulun ve farenin mesanesine bir kateter yerleştirin. İdrarı çıkarmak için mesaneyi yıkayın.
Helicobacter pylori nötrofil aktive edici proteini veya immünomodülatör bir bakteri proteini olan HP-NAP'ı enjekte edin.
Tümör mikroçevresinde, HP-NAP, nötrofiller üzerindeki Toll benzeri reseptörlerle etkileşime girer ve proinflamatuar sitokin ekspresyonunu artıran bir sinyal kaskadı başlatır.
Sitokinler, naif T lenfositlerinin interferon-gama üreten tip 1 T yardımcısı veya Th1 ve tip 1 sitotoksikler veya Tc1 lenfositlerine farklılaşmasını tetikler.
İnterferon-gama, yeni kan damarı oluşumunu inhibe ederek tümörün besin ve oksijen mevcudiyetini sınırlar.
Ek olarak, tümör hücreleri üzerindeki tümör-antijen sunan MHC moleküllerini yukarı regüle ederek Tc1 hücreleri ile etkileşimi kolaylaştırır.
Bu etkileşim, tümör hücresi ölümünü indükleyen sitotoksik moleküllerin salınmasına neden olur ve HP-NAP'ın anti-tümör etkinliğini gösterir.
MB-49 hücrelerinin enjekte edilmesinden en az üç gün sonra, hayvanı uyuşturduktan sonra, gösterildiği gibi kateterize edin ve 200 ila 300 mikrolitre steril PBS içeren 1 mililitrelik bir şırınga kullanarak, kalan idrarı mesaneden yıkayın ve tüm sıvıyı aspire edin.
Mesaneye 150 mikrolitre PBS başına 50 mikrogram Helicobacter pylori nötrofil aktive edici protein veya HPNAP enjekte edin ve sızıntıyı önlemek için şırıngayı katetere bağlı bırakın. Bir saat sonra, kateteri üretradan yavaşça çıkarın ve fareyi uyanana kadar bir ısıtma lambasının altındaki bir kafese yerleştirin.