JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:42 dk. • July 8th, 2025
Primer dalak hücreleri ile karıştırılmış retroviral vektörleri ele alalım.
Vektörler, tümöre özgü bir antijeni hedef alan bir kimerik antijen reseptörünü veya CAR'ı kodlayan transgenik RNA içerir.
Ortamdaki sitokin interlökin-2, diğer hücreler sonunda ölürken, seçici olarak T hücresi proliferasyonunu teşvik eder.
Karışımı, rekombinant fibronektin fragmanları ile kaplanmış bir mikroplakaya aktarın.
Vektörleri ve T hücrelerini bağlayan fibronektin fragmanlarını kolaylaştırmak, virüs-konak hücre etkileşimine aracılık etmek için santrifüjleyin ve inkübe edin.
Vektörlerin zarfının hücre zarı ile füzyonu üzerine, viral enzimler salınan RNA'yı DNA'ya ters kopyalar ve onu konakçı genomuna dahil eder.
Transdüksiyonlu T hücreleri, antijene yanıt vermek için tümöre özgü antijeni ve hücre içi sinyal bölgelerini hedefleyen hücre dışı bir antikor değişken fragmanından oluşan yüzeye bağlı CAR'ları eksprese eder.
Hücreleri bir tüpe aktarmadan önce yeniden süspanse edin.
İçselleştirilmemiş virüsler içeren süpernatanı atmak için santrifüjleyin ve hücreleri aşağı akış tahlilleri için bir tamponda yeniden süspanse edin.
Splenektomiden sonraki gün, mililitre başına 25 mikrogram rekombinant insan Fibron
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin