JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 2:55 dk. • July 8th, 2025
T hücrelerinin bir süspansiyonu ile başlayın ve bunları kimerik antijen reseptörü veya CAR ve CRISPR lentivirüsleri için bir gen taşıyan CAR lentivirüsleri ile tedavi edin.
CRISPR lentivirus, kılavuz RNA ve Cas9 nükleaz için genlerin yanı sıra bir antibiyotik direnç geni içerir.
Hem CAR hem de CRISPR lentivirüsleri T hücreleri ile etkileşime girer ve RNA'larını serbest bırakır.
Bu RNA'lar ters kopyalanır ve T hücresi DNA'sına entegre olan karşılık gelen DNA'ya dönüştürülür.
Bu, CAR proteinlerinin, kılavuz RNA'ların ve Cas9 proteinlerinin sentezini sağlar.
Kılavuz RNA, T hücresi DNA'sındaki hedef geni spesifik olarak tanıyan ve ona bağlanan Cas9 ile bir kompleks oluşturur.
Bu arada, Cas9 DNA'yı parçalayarak çift sarmallı bir kırılma oluşturur.
Bu kırılma, hataya açık bir onarım mekanizması olan homolog olmayan uç birleştirme yoluyla onarılır ve hedef gen modifikasyonu ile sonuçlanır.
Bu, kimerik antijen reseptörleri ile genetik olarak değiştirilmiş T hücreleri üretir.
Değiştirilmemiş T hücrelerini ortadan kaldırmak için hücreleri antibiyotiklerle tedavi edin ve genetik olarak değiştirilmiş CAR T hücrelerini seçici olarak izole edin.
Granülosit-makrofaj koloni uyarıcı faktörü bozmak
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin