Bakteriyel Patojen ile Enfekte Ex Vivo Küçükbaş Hayvan Yaralı Cilt Modelinin Oluşturulması

Antibiyotik içermeyen bir ortamda bir kuzunun alnından elde edilen önceden sterilize edilmiş bir deri biyopsisi bölümü alın.

Kesit bir dış epidermis ve altta yatan bir dermis tabakasından oluşur.

Ortamı çıkarın ve bölümü yıkamak için bir tampon kullanın.

Bölümde dairesel bir kesim yapın ve üst tabakayı çıkarın. Bu, bariyeri kırar ve ciltte bir yara yatağı oluşturur.

Yaralı bölümleri, antibiyotik içermeyen bir ortam içeren çok kuyulu bir plakadaki geçirgen bir membran ekine aktarın.

Yara yatağına bir patojenik bakteri süspansiyonu verin ve inkübe edin.

İnkübasyon sırasında, yara yatağı bakteri bağlanması için bir doku yüzeyi ve bakteri üremesini desteklemek için besinler sağlar.

Bu, bakterilerin yara yatağı boyunca çoğalmasına ve yayılmasına izin vererek bir enfeksiyon oluşturur.

Deri örneğini enfekte etmek için, 400 mikrolitre önceden ısıtılmış antibiyotik içermeyen ortam içeren 24 oyuklu yeni bir plaka hazırlayın ve steril forseps kullanarak 24 oyuklu ekleri ekleyin. Ortamı cilt örneklerinden çıkarın, 500 mikrolitre steril PBS ile yıkayın ve yıkamayı çıkarın.

Numuneyi kuyunun dibine nazikçe tutmak için steril forseps kullanın. Deri örneğini 1 ila 2 milimetre pürüzlü bir derinliğe