JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 2:43 dk. • July 8th, 2025
Pozitif yüklü polimerler içeren donmuş bir polimer çözeltisi ile başlayın.
Polimer çözeltisini oda sıcaklığına ulaşana kadar çözdürün.
Homojen bir çözelti elde ederek homojen bir karışım elde etmek için bir tampon ve girdap ekleyin.
Optimum reaksiyon için hedef mRNA'yı polimer çözeltisine eşit oranda ekleyin.
Pozitif yüklü polimerlerin elektrostatik etkileşimler yoluyla mRNA'daki negatif yüklü fosfat grupları ile etkileşime girmesine izin vermek için inkübe edin.
Bu, mRNA'nın polimer yapısına dahil edilmesini kolaylaştırır ve mRNA-polimer komplekslerinin veya poliplekslerin nanopartiküllerini oluşturur.
Bu polipleksleri RNaz içermeyen su içeren bir tüpe aktarın.
Bunları karıştırın ve poliplekslerin çökelmesine izin verin.
Sükroz içeren bir tampon ekleyin ve dondurun. Sükroz, poliplekslerin yapısal bütünlüğünü koruyan bir kriyoprotektan görevi görür.
Ardından, su kalıntılarını gidermek için dondurarak kurutma yapın.
İleride kullanmak üzere bir mRNA aşı adayı olarak düşük bir sıcaklıkta saklayın.
Polipleks oluşumu için, önceden hazırlanmış polimerler C-6 peptit poli-beta amino esterlerini çözün ve çözeltiyi girdaplayın. Polimer karışımını yukarı ve aşağı pipetledikten sonra, sodyum a
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin