Dendritik Hücrelerin Yüksek Tuz Tedavisi ve Farelere Evlat Edinme Transferi için Bir Yöntem

Dendritik hücrelerin veya DC'lerin bir süspansiyonunu içeren çok kuyulu bir plaka ile başlayın.

Hipertansif bir durumu taklit etmek için, yüksek konsantrasyonda sodyum iyonları içeren bir kültür ortamı ekleyin ve inkübe edin.

İnkübasyon sırasında, sodyum iyonları hücreye girerek hücre içi sodyum konsantrasyonunu arttırır.

Bu, hücre içi sodyum iyonlarının hücre dışı kalsiyum iyonları ile değişimini tetikler.

Artan iç kalsiyum seviyeleri, hücresel proteinlere bağlanan reaktif aldehitlerin oluşumunu kolaylaştıran yolları aktive eder. Bu, bu modifiye proteinleri yüzeylerinde gösteren DC'leri aktive eder.

Kuluçka sonrası, hücreleri bir tüpte toplayın ve santrifüjleyin.

Süpernatanı çıkarın. Hücreleri yeniden askıya almak için yeni tampon ekleyin.

Hücre süspansiyonunu bir şırıngaya çekin.

Anestezi uygulanmış bir fareyi alın ve hücre süspansiyonunu göz yuvasının arkasındaki bir alan olan retroorbital olarak enjekte edin.

Aktive edilmiş bağışıklık hücrelerinin enjekte edilmesi işlemine evlat edinici hücre transferi denir.

900 mikrolitre DC süspansiyonunu 24 oyuklu düz düz tabanlı bir şahin plakasına pipetleyin. 190 milimolar nihai sodyum konsantrasyonu için her bir oyuğa 100 mikrolitre yüks