JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:16 dk. • July 8th, 2025
Bağışıklık hücrelerinden yoksun ve diyabete yatkın olan kısıtlı bir NOD immün yetmezliği olan fare ile başlayın.
Bu fareye, insülin üreten ve lusiferaz enzimlerini eksprese eden transgenik pankreas beta hücreleri önceden enjekte edilmiştir.
Diyabetik bir fareden elde edilen önceden işlenmiş splenositleri içeren bir şırınga alın. Splenositler, insülin peptitlerini tanıma yeteneğine sahip otoreaktif T hücrelerini içerir.
Bu splenositleri farenin kuyruk damarına uygulayın.
Splenositler dolaşır ve otoreaktif T hücrelerinin beta hücreleri üzerindeki insülin peptitlerini tanıdığı ve aktive olduğu pankreasa ulaşır.
Bu aktive edilmiş hücreler, otoreaktivite yoluyla beta hücre yıkımını başlatan sitotoksik molekülleri serbest bırakır.
Ardından, farenin peritonuna bir lusiferaz substratı enjekte edin. Substrat bu bölgede yayılır ve beta hücrelerine girer.
Hücreler içinde, substrat lusiferaz enzimleri ile etkileşime girerek lüminesans üretir.
Biyolüminesan görüntüleme sistemi kullanarak, düzenli aralıklarla görüntü yakalayın
Lüminesansta kademeli bir azalma, otoreaktivite nedeniyle transgenik beta hücrelerinin yok olduğunu gösterir.
Damarları vazodilatlamak için 5 ila 10 dakika boyunca bir ısı
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin