Yama Kelepçesi Yöntemi ile Tüm Hücre Konfigürasyonunun Oluşturulması

0 görüntüleme3:12 dk • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Nöronal canlılığı korumak için yapay bir beyin omurilik sıvısı ile doldurulmuş elektrofizyoloji kurulumunun bir kayıt odasına yerleştirilmiş, hareketsiz hale getirilmiş bir fare beyin dilimi ile başlayın.

Kurulum, bir amplifikatöre ve bir basınç kontrol ünitesine bağlı önceden monte edilmiş katyonik çözelti dolgulu bir kayıt mikropipeti içerir.

Mikroskop altında bir nöron bulun ve mikropipeti yanına yerleştirin.

Herhangi bir kalıntıyı temizlemek için pozitif hava basıncı uygulayın.

Mikropipeti, zar üzerinde nöronal yakınlığı gösteren bir çukur oluşana kadar nörona doğru hareket ettirin.

Mikropipetin içine küçük bir zar yaması çekmek için zayıf emme uygulayın.

Bu, mikropipet direncini artıran ve sağlam bir sızdırmazlığı doğrulayan sıkı bir sızdırmazlık sağlar.

Hücre stabilitesi için hücrenin potansiyelini fizyolojik bir dinlenme potansiyelinde tutun.

Ardından, yama zarını bozmak için kısa, güçlü bir emme uygulayın ve hücrenin iç kısmı ile doğrudan bir bağlantı kurun.

Bu tüm hücre konfigürasyonu, nöronal elektriksel aktiviteyi kaydetmek için hazırdır.

Mikroskobun ince odak tekerleğini kullanarak, mikropipeti kademeli olarak indirirken aşağı odaklamaya başlayın. Her zaman önce aşağıya odaklanın ve ardından mikropipet ucunun dilime aniden nüfuz etmemesini sağlamak için mikropipeti odak düzlemine indirin. Mikropipet dilimin yüzeyi ile temas ettiğinde, mikromanipülatör hızını orta-düşük moda yavaşlatın. Yoldaki kalıntıları temizlemek için hafifçe hafif pozitif basınç uygulayın.

Ardından, X, Y, Z kontrol düğmeleriyle dönüşümlü olarak veya Z ekseni düğmesinin dönüşüyle her iki XZ ekseninin değiştirildiği yere çapraz olarak yaklaşarak hücreye yaklaşın. Mikropipet hücreye yeterince yakın olduğunda, hücre yüzeyinde bir çukur belirecektir.

Şimdi, bir sızdırmazlık oluşturmak için pipet tutucu emme borusuna bağlı olan borudan zayıf ve kısa bir emme uygulayın. Bir gigaseal oluşurken, zar yırtıldıktan sonra ani değişiklikleri önlemek için hücrelerin tutma potansiyelini fizyolojik dinlenme potansiyeline getirmek için bilgisayar kontrollü amplifikatör kumandasını kullanın. Gigaseal oluştuktan sonra, hızlı veya yavaş kapasitansı telafi edin.

Burada uygulanan emişin çok güçlü olmaması çok önemlidir, aksi takdirde membran sızdırmazlık oluşturmadan önce yırtılabilir.

Conta sabit kalırsa ve 1 giga ohm'un üzerindeyse, plazma zarını yırtmak için kısa ve güçlü bir emme uygulayın.

Emme kısa olmalıdır ve zarı düzgün bir şekilde yırtmak ve stabil bir tam hücre konfigürasyonu elde etmek için bir sızdırmazlık oluştururken uygulanan basınçtan daha güçlüdür.

12:00

Yetişkin Rats gelen bozulmamış Dorsal Kök Ganglia üzerinde Patch Kelepçe Kayıtlar

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:30

9-Fenanthrol Duyarlı Katyon Akımlarının Karakterizasyonu İçin Yeni İzole Edilmiş İnsan Detrusor Düz Kas Hücrelerinin Hazırlanması ve Kullanımı

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:52

ALS'yi Bölgesel Olarak Spesifik İnsan Pluripotent Kök Hücre Kaynaklı Astrositler ve Nöronlarla Modellemek için Bir Elektrofizyolojik Platformun Kurulması

İlgili videolar

0 Görüntüler

03:42

Tüm Hücre Yama Kelepçesi Elektrofizyolojisi: Nöronların Elektriksel Özelliklerini İncelemek İçin Bir Yöntem

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:42

Beyin Dilimlerinde Elektrofizyolojik Kayıtlar için Tüm Hücre Voltaj-Kelepçe Konfigürasyonunun Oluşturulması

İlgili videolar

0 Görüntüler

03:34

Vomeronazal Duyusal Nöronlardan Elektrofizyolojik Kayıt için Tam Hücre Yama Kelepçesi Oluşturulması

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:58

Kızılötesi Sinir Stimülasyon en mekanizmaları incelenmesi için tüm Hücre Patch Kelepçe

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:01

Bilgisayar destekli Çoklu elektrot Patch-kelepçe Sistemi

İlgili videolar

0 Görüntüler

13:07

Tek kanallı bir hücre-bağlı Patch-clamp kayıt

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:23

Beyin Dilimleri tüm hücre Patch-kelepçe Kayıtlar

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 1 Ağustos 2026