Yama Kelepçesi Yöntemi ile Tüm Hücre Konfigürasyonunun Oluşturulması

Nöronal canlılığı korumak için yapay bir beyin omurilik sıvısı ile doldurulmuş elektrofizyoloji kurulumunun bir kayıt odasına yerleştirilmiş, hareketsiz hale getirilmiş bir fare beyin dilimi ile başlayın.

Kurulum, bir amplifikatöre ve bir basınç kontrol ünitesine bağlı önceden monte edilmiş katyonik çözelti dolgulu bir kayıt mikropipeti içerir.

Mikroskop altında bir nöron bulun ve mikropipeti yanına yerleştirin.

Herhangi bir kalıntıyı temizlemek için pozitif hava basıncı uygulayın.

Mikropipeti, zar üzerinde nöronal yakınlığı gösteren bir çukur oluşana kadar nörona doğru hareket ettirin.

Mikropipetin içine küçük bir zar yaması çekmek için zayıf emme uygulayın.

Bu, mikropipet direncini artıran ve sağlam bir sızdırmazlığı doğrulayan sıkı bir sızdırmazlık sağlar.

Hücre stabilitesi için hücrenin potansiyelini fizyolojik bir dinlenme potansiyelinde tutun.

Ardından, yama zarını bozmak için kısa, güçlü bir emme uygulayın ve hücrenin iç kısmı ile doğrudan bir bağlantı kurun.

Bu tüm hücre konfigürasyonu, nöronal elektriksel aktiviteyi kaydetmek için hazırdır.

Mikroskobun ince odak tekerleğini kullanarak, mikropipeti kademeli olarak indirirken aşağı odaklamaya başlayın. Her zaman önce aşağıya