JoVE Encyclopedia of Experiments
Sinirbilim
0 görüntüleme • 2:05 dk • July 8th, 2025
Çok kuyulu bir mikro elektrot dizisinde veya MEA'da bir nöron-astrosit ko-kültürü ile başlayın.
Her kuyucuk, insan kaynaklı pluripotent kök hücrelerden veya hiPSC'lerden türetilen bir nöron ağı içerir. Sıçan astrositleri, ağın bakımı için destek sağlar.
Kuyuların tabanı küçük elektrotlardan oluşan bir ızgara içerir.
Nöronal ağın spontan elektrofizyolojik aktivitesini yakalamak için MEA'yı bir kayıt cihazına yerleştirin.
Ortamın buharlaşmasını önlemek ve pH'ı stabilize ederek hücre canlılığını sağlamak için kültüre nemlendirilmiş bir gaz karışımı akıtan.
Nöronlar, aksonları boyunca hareket eden ve aksiyon potansiyelleri olarak bilinen elektriksel uyarılar yoluyla sinyaller iletir.
Sinapsa ulaştıktan sonra, impuls, sinyali bir sonraki nörona yayan nörotransmiterlerin salınımını tetikler.
Her bir kuyucuğun içindeki elektrotlar, sinaptik olarak bağlı çoklu nöronlar tarafından üretilen aksiyon potansiyellerini aynı anda kaydeder.
Nöronal ağın spontan elektrofizyolojik aktivitesi, hiPSC'lerin nöronlara farklılaştığını doğrular.
Verileri 1.200 kat amplifikasyonda elde edin ve MCS veri toplama kartını kullanarak sinyali 10 kilohertz'de örnekleyin. MEA'larda kültürlenen hiPSC türevi nöronların 20 dakikalık elektrofizyolojik aktivitesini kaydedin. Kayıt sırasında, sıcaklığı 37 santigrat derecede tutun ve MEA'lara sabit bir yavaş nemlendirilmiş gaz akışı sağlayarak orta buharlaşmayı ve pH değişikliklerini önleyin. Bundan sonra, özel bir yazılım paketi kullanarak verileri analiz edin.