JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:21 dk. • July 8th, 2025
İşlem için hazırlanan bir sıçanın torasik-12 omuruna tuzlu suya batırılmış bir sünger yerleştirerek başlayın.
Trans-spinal doğru akım stimülasyonu veya omurilik boyunca doğru akım uygulanmasını içeren tsDCS için üzerine bir elektrot yerleştirin.
TSDCS sırasında bir hedef motonöronun hücre içi kaydını ölçmek için, orijininin bulunduğu yerde omuriliğe bir mikroelektrot yerleştirin.
tsDCS sırasında doğru ölçümler için mikroelektrotun güvenli bir şekilde yerleştirildiğinden emin olmak için motonöronun temel membran potansiyelini ve elektriksel uyarıların frekansını değerlendirin.
Akım anottan dokudan katoda akarken pozitif yüklü iyonların nörona girdiği anodal tsDCS'yi uygulayın.
Akım ters yönde akarken negatif yüklü iyonların nörona girdiği katodal tsDCS'yi uygulayın.
Anodal ve katodal tsDCS sırasında motonöronun elektriksel özelliklerindeki değişiklikleri kaydedin.
Trans-spinal doğru akım stimülasyon elektrotlarını yerleştirmek için, TH-12 omurun dorsal tarafına tuzlu suya batırılmış bir sünger yerleştirin ve süngeri aktif bir trans-spinal doğru akım stimülasyon elektrodu ile bastırmak için ince manipülasyon kullanın. Ardından, 1 ila 2 mikronluk bir adımlama hareketine ve stereotaksik kalibrasyona izin veren özel olarak çekilmiş bir mikroelektrotu mikromanipülatöre monte edin ve bir mikropipet ucunu 15 ila 20 derecelik bir medial-lateral açıyla PR'de seçilen bir yamaya sürün.
Motor nöron zarını ve ateşleme özelliklerini kaydetmek için, hücre içi amplifikatörün köprü modunda, antidromik aksiyon potansiyelinin ya hep ya hiç görünümü temelinde motor nöronu tanımlamak için ilgili sinir dallarını uyarın.
4 ila 8 kilohertz'lik bir akım anahtarlama hızı moduna sahip hücre içi amplifikatörün süreksiz akım kelepçesi modunda, bir motor nöronda ortodromik bir aksiyon potansiyelini uyandırmak için 0.5 milisaniyelik bir hücre içi depolarize edici akım darbeleri kullanın.
Hücre giriş direncini hesaplamak için, 40 kısa 100 milisaniye hiperpolarize edici 1 nanoamper akım darbesi ile bir motor nöronu uyarın. Reobaz değerini, tek bir sivri uç ortaya çıkarmak için gereken depolarize edici akımın minimum genliği olarak belirlemek için, artan genliklerde 50 milisaniyelik kare dalga darbeleri olan bir motor nöronu uyarın.
Daha sonra, motor nöronların ritmik deşarjlarını uyandırmak için 0.122 nanoamperlik adımlarla artan genliklerde depolarize edici akımın 500 milisaniyelik kare dalga darbelerini enjekte edin. Trans-spinal doğru akım stimülasyonu için, motor nöronun stabil bir şekilde penetrasyonunu korurken, doğru akımın trans-spinal uygulamasıyla polarizasyon prosedürlerini başlatın.