JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:44 dk. • July 8th, 2025
Yapay beyin omurilik sıvısında veya ACSF'de kırmızı kalsiyuma duyarsız floroforlar içeren bir stimülasyon pipeti alın.
Pipeti hipokampal bir dilimde hedef nöronun yakınına yerleştirin.
Hedefin yakınına kırmızı kalsiyuma duyarsız ve yeşil kalsiyum indikatör floroforlar içeren bir elektrolitle yıkanmış bir kayıt elektrotu olan bir yama pipeti yerleştirin.
Doku yüzeyini kısa bir süre rahatsız etmek için sabit pozitif basınç uygulayın, bu da hedefe yakınlığı gösterir.
Nöronal zar üzerinde çukur oluştuğunda, bir sızdırmazlık oluşturmak için basıncı serbest bırakın.
Contayı sıkmak için negatif basınç uygulayın.
Membran potansiyelini sabit bir negatif voltajda stabilize edin.
Membranı kırmak için negatif basınçla devam edin ve florofor içeren elektrolitlerin nöron içinde yayılmasına izin verin.
Hedef dendritik omurganın kırmızı floresansını görselleştirin ve stimülasyon pipetini bunun yanına hizalayın.
Kalsiyum kanallarını açmak için elektrik darbeleri uygulayın.
Yeşil floresan ile gösterildiği gibi kalsiyum seviyelerindeki geçici değişiklikleri görselleştirmek için iki foton mikroskobu kullanın.
Bu adımda, bir hipokampal dilimi lazer taramalı iki fotonlu bir mikroskop hedefi altında bir
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin