JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:07 dk. • July 8th, 2025
Hedef hücrelerin elektriksel aktivitesini kaydeden bir cihaz olan steril bir çoklu elektrot dizisi veya MEA'yı ele alalım.
MEA'ya bir polimer çözeltisi ekleyin ve inkübe edin.
Polimer, MEA'nın yüzeyini kaplar, böylece yüzeyin su çekme özelliğini arttırır.
Fazla polimeri çıkarın ve deiyonize su ile yıkayın.
Hücre dışı matris veya ECM ekleyin ve MEA'yı kaplamasına izin vermek için inkübe edin. Fazla ECM'yi çıkarın.
Ardından, nöronları ve astrositleri içeren 3D kokültür kürelerini uygun bir ortama ekleyin.
Kürelerin MEA'nın yüzeyine yapışmasını sağlamak için inkübe edin.
MEA'yı bir MEA sisteminin sıcaklık kontrollü bir kafa aşamasına yerleştirin ve elektrotlar boyunca spontan elektriksel aktiviteyi kaydedin.
Ölçülen elektriksel aktivite, küre içindeki nöral kavşaklardaki iletişime karşılık gelir.
Yüzeyi hidrofilik hale getirmek için her bir çoklu elektrot dizisinin veya MEA'nın yüzeyini 1 milimetre poli-ornitin ile kaplayarak başlayın ve en az dört saat boyunca 37 santigrat derecede inkübe edin. İnkübasyonun ardından, poli-ornitini çıkarın ve her MEA'nın yüzeyini deiyonize su ile yıkayın. Daha sonra, 1 mililitre hücre dışı matris ekleyin ve en az dört saat boyunca inkübatöre geri dönün.
Hazır olduğunda, hücre dışı matrisi çıkarın, ardından küreleri 1,5 mililitre ortamda MEA yüzeyine uygulayın ve kürelerin elektrot dizisinin üzerine yerleştirildiğinden emin olun. İki gün yapışmasına izin verin. Nöral kürelerin elektriksel aktivitesini ölçmek için, MEA'yı sıcaklık kontrollü bir kafa aşamasına yerleştirin.