Multielektrot dizisi (MEA) nedir?

Multielektrot dizisi, aynı anda birden fazla hücreden elektriksel aktivite kaydetmek için kullanılan bir cihazdır.

Bu yöntemde neden poli-ornitin kullanılır?

Poli-ornitin, MEA yüzeyini hidrofilik yapmak ve hücre yapışmasını artırmak için kullanılır.

Kokültürde ne tür hücreler kullanılır?

Kokültür, nöronlar ve astrositlerden oluşur.

MEA'nın hücre dışı matris ile ne kadar süre inkübe edilmesi gerekir?

MEA, hücre dışı matris ile en az dört saat inkübe edilmelidir.

Elektrikli aktivite kaydetmenin önemi nedir?

Elektrikli aktivite kaydetmek, sinir ağlarının iletişimini ve işlevselliğini anlamaya yardımcı olur.

Sıcaklık kontrolü MEA kayıtlarını nasıl etkiler?

Sıcaklık kontrolü, hücre aktivitesi için optimal koşulları ve elektrik sinyallerinin doğru kaydedilmesini sağlar.

3D Kokültür Kürelerinde Sinaptik Fizyolojiyi Ölçmek için Çoklu Elektrot Dizilerinin Kullanılması

JoVE Encyclopedia of Experiments

Neuroscience

0 views • 2:07 min • July 8th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hedef hücrelerin elektriksel aktivitesini kaydeden bir cihaz olan steril bir çoklu elektrot dizisi veya MEA'yı ele alalım.

MEA'ya bir polimer çözeltisi ekleyin ve inkübe edin.

Polimer, MEA'nın yüzeyini kaplar, böylece yüzeyin su çekme özelliğini arttırır.

Fazla polimeri çıkarın ve deiyonize su ile yıkayın.

Hücre dışı matris veya ECM ekleyin ve MEA'yı kaplamasına izin vermek için inkübe edin. Fazla ECM'yi çıkarın.

Ardından, nöronları ve astrositleri içeren 3D kokültür kürelerini uygun bir ortama ekleyin.

Kürelerin MEA'nın yüzeyine yapışmasını sağlamak için inkübe edin.

MEA'yı bir MEA sisteminin sıcaklık kontrollü bir kafa aşamasına yerleştirin ve elektrotlar boyunca spontan elektriksel aktiviteyi kaydedin.

Ölçülen elektriksel aktivite, küre içindeki nöral kavşaklardaki iletişime karşılık gelir.

Yüzeyi hidrofilik hale getirmek için her bir çoklu elektrot dizisinin veya MEA'nın yüzeyini 1 milimetre poli-ornitin ile kaplayarak başlayın ve en az dört saat boyunca 37 santigrat derecede inkübe edin. İnkübasyonun ardından, poli-ornitini çıkarın ve her MEA'nın yüzeyini deiyonize su ile yıkayın. Daha sonra, 1 mililitre hücre dışı matris ekleyin ve en az dört saat boyunca inkübatöre geri dönün.

Hazır olduğunda, hücre dışı matrisi çıkarın, ardından küreleri 1,5 mililitre ortamda MEA yüzeyine uygulayın ve kürelerin elektrot dizisinin üzerine yerleştirildiğinden emin olun. İki gün yapışmasına izin verin. Nöral kürelerin elektriksel aktivitesini ölçmek için, MEA'yı sıcaklık kontrollü bir kafa aşamasına yerleştirin.