JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:01 dk. • July 8th, 2025
Bir agar bloğunda büyüyen transgenik Caenorhabditis elegans solucanlarını ele alalım.
Bu solucanlar, yumurtlama davranışını düzenleyen nöronlarda bir kalsiyum indikatörü olan GCaMP5 ve kalsiyuma duyarsız bir floresan proteini olan mCherry'yi eksprese eder.
Solucanları ters çevrilmiş bir mikroskop aşamasına monte edin.
GCaMP5 ve mCherry floresansını görselleştirin.
Yumurta salınımından önce, nöronlar aktive olur ve kalsiyum akışına izin veren voltaj kapılı kalsiyum kanallarını açar.
Hücre içi kalsiyum, GCaMP5'e bağlanarak konformasyonunu değiştirir ve floresansını arttırır.
Bu arada, mCherry floresansı değişmeden kalır ve nöronun izlenmesini sağlar.
Aktive edilmiş nöronlar, belirli kas reseptörlerine bağlanan nörotransmiterleri serbest bırakarak yumurta salınımını tetikler.
Serbest bırakıldıktan sonra, kalsiyum kanalları kapanır, kalsiyum akışını ve GCaMP5 floresansını azaltır.
Ardından, solucan hareketini gözlemlemek için parlak alan görüntüleri yakalayın.
Yumurta bırakmadan önce kas kasılmaları nedeniyle hareketin azalması meydana gelir.
Yumurta salınımını takiben, kaslar gevşer ve normal hareketi geri kazandırır.
Yumurta salınımı olaylarını tespit etmek için GCaMP5-mCherry flores
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin