Penetran Mikroelektrot Dizisi Kullanılarak Katlanmamış Hipokampal Dokunun Nöral Aktivitesinin Kaydedilmesi

Nöral dokudan gelen elektrik sinyallerini kaydeden penetran mikroelektrot dizisini veya PMEA'yı içeren bir kayıt odası alın.

Girişi, bir trivalf konektörü kullanarak 4-aminopiridin veya 4-AP ile oksijenli aCSF ve oksijenli aCSF içeren şişelere bağlayın.

Çıkışı bir vakum tüpüne takın.

Giriş ve trivalf arasındaki boru hattını fizyolojik sıcaklığa ısıtın.

Giriş ve çıkış kapalıyken, katlanmamış hipokampusu odaya aktarın.

Mikroskop altında, hipokampusu PMEA'ya yerleştirin.

Çözeltiyi hazneden çıkarın.

Dokuyu PMEA elektrotlarına tutmak için bir doku ankrajı yerleştirin.

aCSF akışını başlatmak için girişi ve çıkışı açın.

Nöronal iklimlendirmeye izin vermek için dokuyu aCSF ile inkübe edin.

Ardından, 4-AP ile aCSF'de akış. 4-AP, nöronal potasyum kanallarını bloke ederek aksiyon potansiyeli süresini uzatır.

PMEA, hipokampal nöronlardan gelen gelişmiş nöral ateşlemeyle orantılı elektrik sinyallerini yakalar.

Bu prosedürde, bir şişeyi normal aCSF ile ve başka bir şişeyi 4-AP aCSF ile doldurun. Deneylerin başından itibaren çözeltileri %95 oksijen, %5 karbondioksit ile köpürtün. Bir deney sırasında hangi çözeltinin seçileceğini kontrol etmek için bir trivalf konektörü kullanın.

Ardından, çözelti