Bir Elektrofizyoloji Kurulumu Kullanarak Görsel Yol Bütünlüğünü Değerlendirmek için Bir Sıçan Modeli Hazırlama

Işık, gözün fotoreseptörlerini uyarır ve görsel bilgiyi işlemek için beyindeki görsel kortekse elektrik sinyalleri gönderir.

Bu görsel yolun bütünlüğünü ölçmek için, karanlık bir odada anestezi uygulanmış, karanlığa adapte olmuş bir sıçanla başlayın.

Sıçanın alt ön dişlerinin etrafına bir referans VEP elektrodu yerleştirin.

Fareyi, bir Faraday kafesi içindeki ışıkla aydınlatan bir cihaz olan Ganzfeld kasesinin önündeki bir ERG platformunda bir bağlantı şeridi ile sabitleyin.

Referans ERG elektrotlarını gözün ekvatorunun etrafına, skleral halkayı çevreleyecek şekilde yerleştirin ve sabitleyin.

Ardından, kortikal sinyalleri tespit etmek için VEP aktif elektrotlarını önceden implante edilmiş kafatası vidalarına takın.

Işık uyaranlarına tepkilerini ölçmek için kayganlaştırıcı içeren ERG elektrotlarını gözlerin merkezine yerleştirin.

Fazla yağlayıcıyı çıkarın ve elektriksel gürültüyü azaltmak için kuyruğa bir toprak elektrodu yerleştirin.

ERG platformunu Ganzfeld çanağına yaklaştırın ve dış paraziti en aza indirmek için Faraday kafesini kapatın.

Skotopik kayıtlar için tüm işlemler karanlık bir odada gerçekleştirilir. Örnek olarak, elektrot konumlandırma burada normal oda aydınlatması altında gerçekleştirilir. Hayvan 12 saat boyunca karanlığa adapte edildi ve ketamin ve ksilazin ile uyuşturuldu.

Göz bebeği dilatasyonu ve topikal anesteziden sonra, aktif olmayan EP elektrodunu alt kesici dişlerin etrafına asın. Ardından, hayvanı Faraday kafesinde bulunan ganzfeld kasesinin önündeki ERG platformuna yerleştirin. Hayvanı, ense etrafına sıkıca yerleştirilmiş ancak sıkıca olmayan bir cırt cırt şeritle platforma sabitleyin.

Daha sonra, skleral halkayı gözün ekvatorunun etrafına, limbusun yaklaşık üç milimetre gerisinde, invaziv olmayan bir şekilde çevreleyerek ERG aktif olmayan elektrotları konumlandırın. Elektrotları ense etrafındaki cırt cırtlı tutturma şeridine takarak bunu stabilize edin. Kontralateral göz için prosedürü tekrarlayın.

Şimdi, kafatasına önceden implante edilmiş paslanmaz çelik vidalara timsah klipsleri takarak VEP aktif elektrotları sabitleyin. ERG aktif elektrot yerleştirmeden önce, sinyal kalitesini artırmak için elektrot üzerine küçük bir damla %1 karboksimetilselüloz sodyum yerleştirin. ERG aktif elektrotları, özel yapım stereotaksik kola bağlı bir mikromanipülatör kullanarak merkezi kornea yüzeyine hafifçe dokunacak şekilde konumlandırın.

Fazla sıvıyı silerek karboksimetilselüloz sodyumun sklera ile değil sadece kornea ile temas ettiğinden emin olun. Ardından, 2 ila 5 milimetre paslanmaz çelik topraklama iğnesi elektrodunu deri altından kuyruğa yerleştirin. Platformu ganzfeld kasesine yaklaştırın ve her iki retinanın da eşit şekilde aydınlatılmasını sağlamak için hayvanın gözlerinin kasenin açıklığıyla aynı hizada olduğundan emin olun.

Daha sonra, yabancı gürültüyü azaltmak için Faraday kafesini kapatın.