Otomatik Tel kasılmaların kâğıda çizilmesi Yüklü daralma ve Rahatlama Çalışmaları

Bu prosedür, fenilefrin gerilimi altındaki mezenterik dirençli arterlerin reaktivitesini hücre dışı kalsiyumla karşılaştırmak için bebek tuzuna duyarlı ve tuza dirençli sıçanları kullanır. Bu, önce mezenterik arcade'yi hayvanlardan izole ederek ve dirençli arter dallarını inceleyerek gerçekleştirilir. Önümüzdeki. İki paslanmaz çelik telden ilki, diseke edilen arterin kısa bir segmentinden geçirilir ve damar grafik odasına monte edilir.

Daha sonra ikinci paslanmaz çelik tel, birinci tele paralel olarak kap lümeninden geçirilir. Daha sonra, monte edilmiş kap normalleştirilmiş bir iç çevreye gerilir. Prosedürün son adımı, tekrarlanan fenilefrin uygulamaları ile meydan okuyarak ve kümülatif kalsiyum uygulamaları ile gevşeterek damarı yeniden aktive etmektir.

Sonuç olarak, sonuçlar, bir kalsiyum yanıt eğrisine dönüştürülebilen ve EC 50 değerlerini belirlemek için kullanılabilen kaptaki gerilimdeki değişiklikleri göstermektedir. Karşılaştırma için. Bu yöntemi kullanma fikrimiz ilk olarak, sıçan Masonary pillerinin nev ağının bir gpro bakır kalsiyum sens reseptörü eksprese ettiğini keşfettiğimizde aklımıza geldi.

Bu, agonist tarafından aktive edilen acı AIC reseptörleri ile aynı şekilde incelenebilir. Genellikle bu yönteme yeni başlayan bireyler, endotel ve düz kas tabakaları küçük olduğu için zorlanabilir. Gemiler kolayca zarar görebilir.

Bu meydana gelirse, bu kapların mekanik özellikleri tehlikeye girebilir. Başlamak için çalışma alanını ve cerrahi aletleri hazırlayın. Anestezi uygulanmış bir hayvanı sırtına koyun ve karnını alkolle silin.

Orta hat laparotomi yaptıktan sonra, superior mezenterik arter de dahil olmak üzere yaklaşık 85 santimetre bağırsağı çıkarmak için makas kullanın. Proksimal ucu piloriye yakın ve distal ucu ileoçekal bileşkeye yakın kesin. Eksize edilen bölümü, oda sıcaklığında fizyolojik tuz çözeltisi veya PSS içeren kaplanmış bir Petri kabına yerleştirin.

Bağırsağın proksimal ucunu sağa doğru sabitleyin ve ardından bağırsağın geri kalanını saat yönünün tersine sabitleyin. Daha sonra, ikinci ve üçüncü dalı içeren mezenterik arterin bir segmentini ve proksimal uçtan bağırsağın bir parçasını inceleyin. Mezenterik arterin V şeklindeki dal noktasını tanımlayın ve damardan uzaklaştırın.

Arter ile doğrudan teması önlemek için yağ ve bağ dokusunu nazikçe çekmek için forseps kullanın. Montajı başlatmak için, damarı yaklaşık iki milimetre uzunluğunda iki arter segmenti kesin. Arterin lümenini açmak için dört santimetre 40 mikrometre tungsten içermeyen paslanmaz çelik telin ucu kullanılabilir.

Ardından, teli her arterin lümenine yerleştirmek için ince forseps kullanın. Endotelyuma zarar vermemeye dikkat ederek, myo greft odasını 37 santigrat derecede PSS ile doldurun. Dişli kap segmentini hazneye aktarmak için forseps kullanın.

Daha sonra, eksize edilen proksimal damar segmentini miyograf odasına aktarın ve damar içine beslemek için ucunu tel boyunca çekin. Damarı germekten kaçının. Telin yakın ucunu, mikrometreye bağlı sağ çenedeki yakın sabitleme vidasının altına saat yönünün tersine sabitleyin.

Telin serbest ucunu forseps ile yakalayın ve sağ çenedeki uzak sabitleme vidasının altına saat yönünde sabitleyin, tel boyunca damar segmentinin çenenin kendisiyle herhangi bir temas etmeden çeneler arasındaki boşluğa yerleştirildiğinden emin olun. Çeneleri ayırın. İkinci kabloyu kaba paralel olarak hizalayın ve lümenin uzak ucuna yerleştirin.

Önceden monte edilmiş teli kılavuz olarak kullanarak teli damar segmentinin lümeninden tek bir hareketle nazikçe besleyin. Manevra sırasında gerilmesini önlemek için teli damardan yaklaşık bir santimetre uzakta tutun ve endotelyuma dokunmaktan kaçının. Çeneleri birbirine vidalayın ve ikinci montaj telinin sağ taraftan sabitlenmiş ilk telin altına hareket ettiğinden emin olun.

Çene: İkinci telin yakın ucunu, dönüştürücüye bağlı sol çenenin yakın sabitleme vidasının altına saat yönünde sabitleyin. Telin uzak ucunu sol çenedeki sabitleme vidasının altına sabitleyin ve teli germek için sıkın. Montaj tamamlandıktan sonra, 37 santigrat derecede dengeleme için 30 dakika bekleyin.

Dengelemeden sonra, motor montaj menüsünden sıfırlanır ve kabı normalleştirilmiş bir iç çevreye geren normalleştirme prosedürü başlatılır. Başlamak için normalleştirme menüsünü açın ve hedef transmural basıncı 13,3 kilopaskal olarak ayarlayın. Ardından, normalleştirme adımlarının her birinin süresini 60 saniye olarak ayarlayın.

IC bir ila IC 100 oranı 0,9'a eşit olmalı ve IP kalibrasyonu iki yıldız deltaya ayarlanmalıdır. Monte edilmiş mezenterik arterin uzunluğunu, saç çizgileri uzak ve damar segmentinin nöronları üzerindeyken mikroskop mercek okumalarını kullanarak ölçün. Normalizasyondan sonra, bir dizi stimülasyon ve yıkama periyodundan oluşan standart bir başlatma gerçekleştirilerek damarlar yeniden aktif hale getirilir.

İlk olarak, myo haznesi kapağını değiştirin ve havalandırmayı %95 hava ve %5 karbondioksit ile başlatın. Hazneyi 100 mikromolar askorbik asit içeren taze PSS ile doldurun. Kabı beş mikromolar rezene, rine veya PE ile beş dakika boyunca kasın ve PSS tamponu ile dört kez yıkayın Son yıkamadan sonra, hazneyi PSS ile yeniden doldurun ve hazneyi PSS ile yeniden doldurmadan ve daha önce gösterilen PE.As ile büzülmeden önce üç dakika bekleyin, arter artık deney için hazırdır.

Kümülatif olarak artan konsantrasyonlarda kalsiyum klorür ekleyerek kasılmış damarların gevşemesini ölçün. Bu tablo, fenilefrin uygulamasını takiben bazal gerilimlerin wistar DS veya bebek tuzuna duyarlı ve DR veya bebek tuzuna dirençli sıçanlar arasında değiştiğini göstermektedir. Bir wistar sıçanından alınan bu iz, Wistar sıçanlarına kıyasla DS sıçanlarından alınan dokularda ciddi şekilde tehlikeye atılmış kümülatif kalsiyum gevşemesi ilaveleri ile PE kasılmış arterlerin gevşemesini gösterir ve burada görüldüğü gibi Dr.Rats ile karşılaştırıldığında, kalsiyum duyarlılığındaki farklılıklar kalsiyum yanıt eğrilerinde ve yine EC 50 değerleri hesaplanırken görülebilir.

Son olarak, DS sıçanları, Dr.Rats'ın bir zamanlar ustalaştığı ile karşılaştırıldığında, arterlerdeki kalsiyum algılama reseptörünün ekspresyonunda bir azalma gösterir. Bu teknik, uygun şekilde yapılırsa iki saat içinde yapılabilir. Bu videoyu izledikten sonra, izometrik koşullar altında küçük me enterik attrinin vasküler reaktivitesini eksojen bileşiğe nasıl karşılaştıracağınızı iyi anlamış olmalısınız.