Name: Otomatik Tel kasılmaların kâğıda çizilmesi Yüklü daralma ve Rahatlama Çalışmaları (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-09-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 51 s
Description: Öğrenin otomatik miyografi yöntemiyle izole mezenterik arterlerde kuvvet ölçümü ve damar reaktivitesi analizi. Bu teknik, fenilefrin ve kalsiyum yanıtlarını değerlendirerek kardiyovasküler araştırmalarda tutarlı sonuçlar sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ödülü Numaraları R01 HL064761, R25 HL059868 1SC1 HL099139 ve Sağlık P20 MD000175 formu Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından açıklanan proje desteklenmiştir. Içeriği sadece yazarların sorumluluğundadır ve mutlaka Ulusal Sağlık Enstitüleri resmi görüşlerini temsil etmemektedir.

1. Sıçan mezenterik arter izolasyonu <ol><li> Kapalı bir odasında izofluran ile hayvan anestezisi ve karın alkol ile silin. </li><li> Mezenterik yatakta ortaya çıkarmak için bir orta hat laparotomi gerçekleştirin. </li><li> Makaslar kullanılarak, superior mezenterik arter damarsal beslenme ile bağırsak yaklaşık 85 cm kaldırın. Pilorusta yakın bağırsak bölümünde ve bağırsak coecal kavşak yakınında distal ucu proksimal ucunu kesin. Bağırsak segmentleri açık göğüs kalp ponksiyon izofluran ve ötenazi ile derin anestezi sıçanların izole edilmiştir. </li><li> PSS içeren kaplı petri eksize bölümüne yerleştirilir ve oda sıcaklığında mezenterik arter diseksiyon. </li><li> Sağ tarafta bağırsak proksimal ucu aşağı pin ve intestineina saat yönünün tersine (bağırsak uzak tarafında sol besleme damarsal ieproximal sonuna) geri kalan pin. </li><li> Proksimal segmentinin bir parça ile birlikte şube II ve III segmentleri teşrih. </li><li> Ven inceleyin ve arter izole (V-şekilli şube noktası ile) ve yağ ve bağ dokusu ortadan kaldırarak temiz. Forseps ile yavaşça çekerek ve bağ dokusu zarından kesme arter ile doğrudan temastan kaçının. </li></ol> 2. Geminin montajı <ol><li> Ince bir forseps ile 40 mikron tungsten paslanmaz çelik tel, iki kısa kesimleri (≈ 4 cm) kesin ve endotele zarar vermemeye özen her arter lümen içine yerleştirin. Gerekirse lümen açmak için tel ucu kullanın. Kan damar dışına akışı iyi bir işaret lümen açıldı. </li><li> 115 NaCl, 4.7 KCl, 1.4 MgSO 4 .7 H 2 O, 5 NaHCO 3, 1.2 K 2 HPO 4, 1.1 Na 2 HPO 4, 1.0 CaCl 2, 20 Hepes ve: mM; fizyolojik tuz solüsyonu (PSS myograph odasının doldurun 37 5 glikoz, askorbik asit (100 mcM) ile pH 7.4) ° C ve forseps kullanarak dikkatli bir şekilde oda sıcaklığında odasına petri dişli damar segmenti transfer ve myograph odasına eksize proksimal damar segmentinin transferi ve çekme geminin içine beslemek için tel boyunca sonunda. Gemi uzanan kaçının. </li><li> Tel yakın sabitleme vidası mikrometre bağlı sağ çene altında saat yönünün tersine yakın ucunu sabitleyin. Forseps ile telin serbest ucunu yakalayın ve saat yönünde, sağ çene uzak sabitleme vidası altında güvenli. Tel boyunca geminin segment çene kendisi ile herhangi bir temas yapmadan çene arasındaki boşluğu yer olduğundan emin olun. </li><li> Dışında çene Vida ve gemi ile ikinci tel paralel hizalamak ve lümen uzak ucuna takın. Yavaşça bir kılavuz olarak önceden monte edilmiş tel kullanarak bir hareket damar segmentinin lümen yoluyla tel besleme. Gemi manevrası sırasında germe önlemek için yaklaşık 1 cm tel tutun ve endotel dokunmaktan kaçının. </li><li> Çene birlikte Vida ve ilki altındaki ikinci montaj tel hamle sağ çene güvenli olmasını sağlamak. </li><li> Yakın sabitleme vidası transdüser bağlı sol çene altında bir saat yönünde ikinci tel sona yaklaştığını sabitleyin. </li><li> Güvenli ve sabitleme vidası sol çene altında tel ucunda tel germek için sıkın. </li><li> Bir kez montajı tamamlandığında, "Montaj Menü" motor sıfırlamak ve geminin normalleşme başlatın. </li></ol> 3. Normalleştirme Otomatik Çift Tel Myograph System-510A "Normalizasyon" menüsünden değerlendirilir otomatik bir normalleştirme işlevi vardır ve gemi az 30 dakika için dengeleme sonra üretici firmanın protokolüne göre standart bir prosedür ile normalleştirilmiş bir iç çevresi gergin olması sağlar 37 ° C Üstel sonra iç çevresi basınç verilerine takılmıştır. Bu prosedür, arter, 1 100 mmHg bir transmural basınç altında rahat, in vivo olarak vardı ve var olacağını lümen çapı (d 100) tanımlar sıçan mezenterik arter için normalleşme parametreleri aşağıdaki gibidir: <ol><li> Hedef transmural basıncı = 13,3 kPa (100 mm Hg). </li><li> Zaman = 60 sn; normalleşme adımları her Süresi. </li><li> IC 1 / IC 100 = 0.9 (IC 1 = normalize iç çevresi, IC 100 = Hedef basınca tekabül eden iç çevresi . </li><li> Vizör kalibrasyon 2 * Δ (mm / oküler bölme); 2 delta programlama nedenlerden dolayı. </li></ol> Hairlines monte gemi segm uzak ve yakın uçları bittiğinde mikroskop göz parça okuma kullanarak monte mezenterik arter uzunluğunu ölçünent. Kısaca, diseksiyon mikroskobu kalibre edilmiş bir göz göz parça monte damar segmentinin uzunluğu ile maksimum büyütme ölçülür. Segmentin en uç (1) üzerinden saç hattı ile göz parça okuma ve oküler bölünmeler segmentinin yakın sonunda (2) ölçülür ve kaydedilir. Bu değerler, mikrometre okumaları, gemi germe önce ve sonra kaydedilir ve program için menüler girilen monte eğrisi ve iç çapı 100 mm Hg hedef transmural basınç karşılık gelen hesaplamak Çalışmalarda, damar lümen çapı d 1 = 0.9 etkin bir güç geliştirme maksimal xd 100,. Sıçan mezenterik arterlerde ≥ 10 mN Aktif kuvvet gelişimi devam etmek için deneyler için optimum olarak kabul edilir. Alt aktif güçle Dokular atıldı. 4. Tepkilerin ölçülmesi Normalleştirme sonra, gemilerin mekanik ve fonksiyonel özellikleri tekrarlanabilir kasılmaları elde etmek için 5 mcM fenilefrin (PE) tekrarlanan uygulamaları (normalde 2 ya da 3) ile zorlu damarları içeren bir "standart start" yaparak yeniden aktive edilir. Laboratuvarımızda tipik bir "standart start" uyarılara ve yıkanmaya dönemleri aşağıdaki gibi bir dizi oluşur: <ol><li> Myograph odası% 95 hava ve% 5 CO 2 ile kaplayın ve havalandırma değiştirin. </li><li> Taze PSS (100 mcM askorbik asit içeren) ile oda doldurun </li><li> Sözleşme 5 dakika için 5 mcM PE ile gemi ve PSS tamponu ile 4 kez yıkayın. </li><li> Sonra son yıkama, PSS ile dolum haznesi ve adımların, (ii) tekrar önce 3 dakika bekleyin ve (iii). </li></ol> Standart başladıktan sonra, arter deney için hazır. Sözleşmeli damarları gevşeten CaCl 2 artan konsantrasyonlarda (0.5 - 4 mM) kümülatif olarak değerlendirilir. inhibitörleri kullanılır. damarları deneyleri sırasında 20 dakika ve şu an için myograph odasında bileşikleri ile önceden inkübe edilir. 5. Veri Analizi SigmaPlot 11.0 grafik programı (Systat Yazılım, Richmond, CA) ile gemiler ve kuvvet iz, doğrudan metin veri dönüştürülür "Normalizasyon" veri analiz ve Şekil 1'de gösterildiği gibi çizilir. Iz hesaplanan konsantrasyon-yanıt veriler, programın Farmakoloji menüsünde dört parametreli lojistik fonksiyonu monte deneysel veriler EC 50 değerleri ile analiz edildi. Gruplar arasında ve grup içi karşılaştırmada ise Tek Yönlü Varyans Analizi (ANOVA) ve p &lt;0.05 anlamlı olarak kabul edilir farklılıklar tarafından gerçekleştirildi. 6. Temsilcisi Sonuçlar: <table border="1"><tbody><tr><th> Parametreler </th><th> Wistar </th><th> Dahl Tuz Duyarlı </th><th> Dahl Tuz-Dirençli </th></tr><tr><td> L 100 (mikron) </td><td> 83,26 ± 2,33 </td><td> 91,52 ± 4,67 </td><td> 117,45 ± 8.43 * </td></tr><tr><td> X 1 </td><td> 604,21 ± 41,97 </td><td> 752,24 ± 85,25 </td><td> 745,84 ± 110,09 </td></tr><tr><td> r 2 </td><td> 0.99 ± 0.003 </td><td> 0.97 ± 0.008 </td><td> 0.97 ± 0.007 </td></tr></tbody></table> * Wistar ve DR L 100 değerleri arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlı. Shapiro-Wilk Normallik Testi (p = 0,588) geçti; Eşit Varyans Testi (p = 0,237) geçti. 100 L = monte segmenti hedef transmural basınç ilgili İç çapı. X 1 = normalize iç çevresi (yani hangi deneyler yapıldı mikrometre okuma değeri) monte gemi germek için gerekli mikro pozisyoner ayarı. r 2 üstel eğriyi = oturması için regresyon katsayısı (X i, Y i). Not: Ayrıntılı prosedür 510A Myograph Sistemi 6 kılavuzda açıklanmıştır. Tablo 1: Örnek okuyun-Out "Normalizasyon Menüsü" nde gösterilen Basic programı Wistar, DS ve DR mezenterik arter segmentleri için normalleşme parametreleri. Değerler 5 hayvanların (± SEM) anlamına gelir. Wistar ve DS için L 100 değerleri arasındaki farklar istatistiksel olarak anlamlı (p &lt;0.05). <table border="1"><tbody><tr><th> Wistar </th><th> DS </th><th> DR </th></tr><tr><td> 14.2 ± 0.6 </td><td><td> 20.9 ± 1.3 * </td></td></tr></tbody></table> Tablo 2, her bir gemi için 5 mcM PE uygulamaları aşağıdaki, Wistar, DS ve DR sıçan izole mezenterik arterler, geliştirilen gerilimler ( MN). Bildirilen değerlerin 6-8 hayvanların (± SEM) anlamına gelir. * Wistar denetimleri önemli derecede farklılık (p &lt;0.05). <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3119/3119fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1. Ca 2 + PE-sözleşmeli bir Wistar sıçan mezenterik arter e-kaynaklı rahatlama fizyolojik tuz çözeltisi içeren 1 mM Ca 2 + tel myograph monte edilmiş . Arter 30 dakika süreyle 37 ° dengelenmiş ° C sürekli havalandırma ve yanıtları Ca 2 + e belirlenir. PE Ca 2 kümülatif eklemeler 5 mcM ek dayanan bir temsilci force + gösterilmiştir. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3119/3119fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2 Ca 2 + PE-sözleşmeli DS sıçan mezenterik arter e-kaynaklı rahatlama fizyolojik tuz çözeltisi içeren 1 mM Ca 2 + tel myograph monte edilmiş . Arter 30 dakika süreyle 37 ° dengelenmiş ° C sürekli havalandırma ve yanıtları Ca 2 + e belirlenir. PE Ca 2 kümülatif eklemeler 5 mcM ek dayanan bir temsilci force + gösterilmiştir. Ca 2 + rahatlama ciddi Wistar ve DR sıçan göre bu doku içinde tatlıya bağlandı. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3119/3119fig3.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 3"> Şekil 3. Ca 2 + PE-DR sıçan sözleşmeli mezenterik arter e-kaynaklı rahatlama fizyolojik tuz çözeltisi içeren 1 mM Ca 2 + tel myograph monte edilmiş . Arter dengelenmiş az 30 dakika süreyle 37 ° C sürekli havalandırma ve yanıtları Ca 2 + 5 mcM PE Ca 2 kümülatif eklenen ek iz e determined.A temsilcisi force + gösterilmiştir. <img alt="Şekil 4" src="/files/ftp_upload/3119/3119fig4.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 4"> Şekil 4. A. [Ca 2 +] E-yanıt eğrileri B. DR ve DS sıçanların izole mezenter eğlencelerle dört parametre lojistik curve.C.CaR ifade veri sıkıştırılmak suretiyle belirlenir dinlenmek için EC 50 değerlerini gösteren Çubuk grafik.

<ol><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+properties+of+vascular+smooth+muscle+cells+in+situ%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ.</a> Nature. 260, 617-619 (1976).</li>
<li>Bevan, J. A., Osher, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+direct+method+for+recording+tension+changes+in+the+wall+of+small+blood+vessels+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Agents+Actions%22%5BJournal%5D)">A direct method for recording tension changes in the wall of small blood vessels in vitro.</a> Agents Actions. 2, 257-260 (1972).</li>
<li>Mulvany, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Procedures+for+investigating+of+small+vessels+using+small+vessel+myograph%5BTitle%5D)+AND+%22DMT+Danish+Myo+Technology%22%5BJournal%5D)">Procedures for investigating of small vessels using small vessel myograph.</a> DMT Danish Myo Technology. , (2004).</li>
<li>Angus, J. A., Wright, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+to+study+the+pharmacodynamics+of+isolated+large+and+small+blood+vessels%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Toxicol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Techniques to study the pharmacodynamics of isolated large and small blood vessels.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 44, 395-407 (2000).</li>
<li>Halpern, W., Mulvany, M. J., Warshaw, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+properties+of+smooth+muscle+cells+in+the+walls+of+arterial+resistance+vessels%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mechanical properties of smooth muscle cells in the walls of arterial resistance vessels.</a> J. Physiol. 275, 85-101 (1978).</li>
<li>Lindhorst, J., Alexander, N., Blignaut, J., Rayner, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+hypertension+between+blacks+and+whites%3A+an+overview%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc.+J.+Afr%22%5BJournal%5D)">Differences in hypertension between blacks and whites: an overview.</a> Cardiovasc. J. Afr. 18, 241-247 (2007).</li>
<li>Eley, S. L., Allen, C. M., Williams, C. L., Bukosi, R. D., Pointer, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Action+of+thiazide+on+renal+interstitial+calcium%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Hypertens%22%5BJournal%5D)">Action of thiazide on renal interstitial calcium.</a> Am. J. Hypertens. 21, 814-819 (2008).</li>
<li>Palmer, C. E., Rudd, M. A., Bujoski, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+interstitial+Ca2%2B+during+sodium+loading+of+normotensive+and+Dal-salt+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Hypertens%22%5BJournal%5D)">Renal interstitial Ca2+ during sodium loading of normotensive and Dal-salt hypertensive rats.</a> Am. J. Hypertens. 16, 771-776 (2003).</li>
<li>Hurwitz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Homeostatic+control+of+plasma+calcium+concentration%5BTitle%5D)+AND+%22Crit.+Rev.+Biochem.+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Homeostatic control of plasma calcium concentration.</a> Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. 31, 41-100 (1996).</li>
<li>Brown, E. M., MacLeod, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+sensing+and+extracellular+calcium+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Extracellular sensing and extracellular calcium signaling.</a> Physiol. Rev. 81, 239-297 (2001).</li>
<li>Breitwieser, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+calcium+as+an+integrator+of+tissue+function%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Biochem.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Extracellular calcium as an integrator of tissue function.</a> Int. J. Biochem. Cell Biol. 40, 1467-1480 (2008).</li>
<li>Mupanomunda, M. M., Wang, Y., Bukoski, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+chronic+sensory+denervation+on+Ca2%2B-induced+relaxation+of+isolated+mesenteric+resistance+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effect of chronic sensory denervation on Ca2+-induced relaxation of isolated mesenteric resistance arteries.</a> Am. J. Physiol. 274, 1655-1661 (1998).</li>
<li>Mupanomunda, M. M., Ishioka, N., Bukoski, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstitial+Ca2%2B+undergoes+dynamic+changes+sufficient+to+stimulate+nerve-dependent+Ca2%2B-induced+relaxation%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Interstitial Ca2+ undergoes dynamic changes sufficient to stimulate nerve-dependent Ca2+-induced relaxation.</a> Am. J. Physiol. 276, 1035-1042 (1999).</li>
<li>Mupanomunda, M. M., Tian, B., Ishioka, N., Bukoski, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+interstitial+Ca2%2B%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Renal interstitial Ca2+.</a> Am. J. Physiol. Renal Physiol. 278, F644-F649 (2000).</li>
<li>Awumey, E. M., Hill, S. K., Diz, D. I., Bukoski, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytochrome+P-450+metabolites+of+2-arachidonoylglycerol+play+a+role+in+Ca2%2B-induced+relaxation+of+rat+mesenteric+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cytochrome P-450 metabolites of 2-arachidonoylglycerol play a role in Ca2+-induced relaxation of rat mesenteric arteries.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 294, 2363-2370 (2008).</li>
<li>Chen, W., Bergsman, J. B., Wang, X., Gilkey, G., Pierpoint, C. R., Daniel, E. A., Awumey, E. M., Dauban, P., Dodd, R. H., Ruat, M., Smith, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Presynaptic+external+calcium+signaling+involves+the+calcium-sensing+receptor+in+neocortical+nerve+terminals%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Presynaptic external calcium signaling involves the calcium-sensing receptor in neocortical nerve terminals.</a> PloS One. 5, e8563-e8563 (2010).</li>
<li>Bukoski, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+perivascular+sensory+nerve+Ca2%2B+receptor+and+blood+pressure+regulation%3A+a+hypothesis%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Hypertens%22%5BJournal%5D)">The perivascular sensory nerve Ca2+ receptor and blood pressure regulation: a hypothesis.</a> Am. J. Hypertens. 11, 1117-1123 (1998).</li>
<li>Bukoski, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+Ca2%2B+and+blood+pressure%3A+evidence+that+Ca2%2B-sensing+receptor+activated+sensory+nerve+dilator+activity+couples+changes+in+interstitial+Ca2%2B+with+vascular%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Dietary Ca2+ and blood pressure: evidence that Ca2+-sensing receptor activated sensory nerve dilator activity couples changes in interstitial Ca2+ with vascular.</a> 16, 218-221 (2001).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Hipertansiyon, kalp-damar, beyin ve böbrek morbidite / mortalitenin önde gelen nedenidir. Hipertansiyon oluşumu nüfusun yüksek olduğu ve tuz duyarlı hipertansiyon özellikle yaşlanan nüfus, yüksek ve siyahlar beyazlara nazaran daha yaygındır. Bunun nedeni, onların böbrekler 9 sodyum korumak için siyahların eğilimi olduğuna inanılıyor . Tuz duyarlılık, böbrek hastalığı için önemli bir faktör ve endotel disfonksiyonu ile ilişkili, fakat mekanizması tam olarak anlaşılmış değildir. Laboratuvarımızda son çalışmalar...

<table border="1"><tbody><tr><th> Ekipman / reaktif Adı </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th><th> Yorumlar (isteğe bağlı) </th></tr><tr><td> Otomatik Çift Tel Myograph System-510A DMT-USA, Inc. </td><td> Atlanta, GA. </td><td> 100151 </td><td></td></tr><tr><td> PowerLab/4SP Veri Toplama Sistemi </td><td> ADInstruments, Colorado Springs, CO </td><td> ML750 </td><td> 4-16 giriş kanalları ile yeni modeller mevcuttur. </td></tr><tr><td> Dell Dimension XPS Gen 4 Bilgisayar </td><td> Vadi </td><td></td><td></td></tr><tr><td> STEMI SV II (Apo) Oküler ile Diseksiyon Mikroskop </td><td> Carl Zeiss Uluslararası. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Wistar, Dahl tuz duyarlı, Dahl tuz dirençli sıçanların </td><td> IN Harlan Sprague Dawley, Indianapolis,. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Kemirgen chow </td><td> Harland Tekland, Madison, WI. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Fenilefrin </td><td> Sigma-Aldrich, St Louis, MO. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Diğer kimyasallar </td><td></td><td></td><td> Kullanılan tüm kimyasallar, piyasada bulunan en saf notları. </td></tr></tbody></table>

otomatik tel kasılmaların kâğıda çizilmesi yüklü daralma ve rahatlama Çalışmaları

Mesenteric Artery Contraction and Relaxation Studies Using Automated Wire Myography

Proksimal direnç damarları, mezenterik arterler gibi periferik direnç önemli ölçüde katkıda bulunur. 100-400 mm arasında çapa işlevi öncelikle vücudun genel gereksinimlerine göre çeşitli organlara kan akışını yönlendirerek bu küçük gemiler. Sıçan mezenterik arter, 100 mm daha büyük bir çapa sahip. Kasılmaların kâğıda çizilmesi tekniği, ilk olarak Mulvay ve Halpern 1 açıklanan Bevan ve Osher 2 tarafından önerilen yöntem dayanmaktadır . Teknik kas hazırlanmasında önemli bir kısalma önlenir izometrik koşullar altında, küçük gemiler hakkında bilgi sağlar. Farklı agonistleri gemilerin yürürlüğe üretim ve duyarlılık aktif gerilim uzunlukta ilişkisi göre, streç ölçüde bağımlı olduğu için, montaj teller uygun önlemek için izometrik koşullar altında daralma çalışmalar yapmak şarttır. Paslanmaz çelik teller kaydedilen yanıtlar 3 etkileyen ikincisi, oksidasyonu nedeniyle tungsten teller tercih edilir. Tekniği, damar düz kas hücre reseptörleri normal fonksiyonu için kanıt elde etmek için monte gemilerin agonist bağlı kasılmalar karşılaştırılmasına olanak sağlar . Biz phenylyephrine ile sözleşmeli izole mezenterik arterler ekstrasellüler kalsiyum (Ca 2 + e) kümülatif konsantrasyonlarda eklenmesi üzerine dinlenmek çeşitli çalışmalarda gösterilmiştir. Bulgular bize G-protein-birleştiğinde Ca 2 +-algılayan reseptör (SYR) ifade eden bu perivasküler duyusal sinirler, sonucuna götürdü, bu vasorelaxation yanıt arabuluculuk . Otomatik bir tel kasılmaların kâğıda çizilmesi yöntemi kullanarak, Wistar, Dahl tuz-duyarlı (DS) ve tuza dayanıklı Dahl (DR) mezenterik arterler sıçan Ca 2 + e farklı yanıt verdiğini göstermektedir. Wistar sıçanlarda Dokular + hassasiyet DR ve DS olanlara kıyasla daha yüksek Ca 2 gösterdi. DS sıçan mezenterik arterler azalma araba ifade azalır Ca 2 + e-indüklenen izole, ön sözleşmeli arterlerin rahatlama ile ilişkilidir. Veri, araba, mezenterik arterler artmış adrenerjik ton altında rahatlamak için gerekli olduğunu öne sürdüğü gibi hipertansiyon oluşur ve çok daha şiddetli DS Dahl hayvanlarda araba sinyal yolağı içsel bir kusur, göstermektedir. Yöntem, mezenterik direnç arter ve farklı agonist ve / veya antagonistleri arasındaki benzer küçük kan damarlarını ve karşılaştırmalar vasküler reaktivite ex vivo belirlenmesinde yararlı yan yana 6,7,8 kolay ve sürekli olarak değerlendirilir olabilir .

Izole mezenterik arterler kuvvet ölçümleri için otomatik bir kasılmaların kâğıda çizilmesi yöntemi açıklanmıştır. Fenilefrin ve ekstrasellüler kalsiyum yanıtlarını belirlemek için 510A Mulvany Halpern Otomatik Çift Tel Myograph kullanır. 300 mikron, bağımsız yöntemi 60 çaplarının küçük damarlarda agonistleri izometrik yanıtları tutarlı tespitine imkan sağlamaktadır.

Otomatik Tel kasılmaların kâğıda çizilmesi Yüklü daralma ve Rahatlama Çalışmaları

Mezenterik arterler gibi proksimal direnç damarları, periferik dirence önemli ölçüde katkıda bulunur. ... arasındaki bu küçük damarlar...

Bu prosedür, fenilefrin gerilimi altındaki mezenterik direnç arterlerinin hücre dışı kalsiyuma karşı reaktivitesini karşılaştırmak için tuz hassas ve tuza dayanıklı sıçanlar kullanır. Bu işlem, öncelikle hayvanlardan mezenterik arkadın izole edilmesi ve direnç arteri dallarının diseke edilmesiyle gerçekleştirilir. Ardından, iki paslanmaz çelik telden birincisi diseke edilen arterin kısa bir segmentinden geçirilir ve damar graf kamerasına monte edilir.Ardından, ikinci paslanmaz çelik tel, birinci tele paralel olacak şekilde damar lümeninden geçirilir. Sonrasında, monte edilmiş damar normalize edilmiş bir iç çevreye kadar gerilir. Prosedürün son adımı, damarı tekrarlanan fenilefrin uygulamalarıyla uyararak ve kümülatif kalsiyum uygulamalarıyla gevşeterek yeniden aktive etmektir.Sonuç olarak, veriler damardaki gerilim değişikliklerini göstermektedir; bu veriler bir kalsiyum yanıt eğrisine dönüştürülebilir ve EC 50 değerlerini belirlemek için kullanılabilir. Karşılaştırma amacıyla; bu yöntemi kullanma fikri ilk olarak, sıçan Masonary bataryalarının sinir ağının bir gpro bakır kalsiyum duyarlı reseptörü eksprese ettiğini keşfettiğimizde ortaya çıkmıştır.Bu durum, agonist tarafından akti

mesenteric-artery-contraction-relaxation-studies-using-automated-wire

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Yılanı / dilatör yanıtları (basınç kasılmaların kâğıda çizilmesi kullanarak) ölçümleri ile paralel izole arteriyel miyositler (yama elektrofizyolojik teknikler kelepçe kullanarak) KV7 (KCNQ) potasyum kanal aktivitenin ölçümleri vasküler düz kas fizyolojisi KV7 kanalları rolleri hakkında önemli bilgiler ortaya çıkarmak ve olabilir farmakoloji.

Patch Clamp Elektrofizyoloji ve Basınç kasılmaların kâğıda çizilmesi kullanarak arteriyel düz kas KV7 Potasyum Kanal Fonksiyon Exploring

Basınç kasılmaların kâğıda çizilmesi olarak, bir geminin bir sağlam küçük bir bölümü iki küçük kanüller üzerine monte edilir ve uygun bir lümen basınca basınçlandırılmıştır. Burada, fare 3 vasorelaxation tepki ölçmek için yöntem...

Basınç kasılmaların kâğıda çizilmesi kullanarak Murine Direnç Arter Fonksiyon değerlendirilmesi

Basınç myography basınçlı zaman sürekli daralma geliştirmek küçük arterlerin vazoaktiviteye değerlendirmek için kullanılır. Bu yazıda sıçanların, vazoaktiviteye ve damar çapı intraluminal basıncın etkisi küçük mezenterik arterler izole segmentlerinde değerlendirmek için ayrıntılı bir protokol sağlar.

Basınç myography kullanma Direnç Mezenterik Arter ise andMyogenic Tepkisi ve vazoaktiviteye Değerlendirilmesi

Bu el yazması sıçan beyin direnç arterlerin vasküler işlevinde değerlendirilmesinde vitro video mikroskobu iletişim kurallarını açıklar. El yazması da microvessel yoğunluğu fluorescently etiketli lektin ve doku perfüzyon lazer Doppler Flowmetry kullanarak değerlendirmek için teknikler açıklanır.

Sıçan izole direnç arter Video mikroskobu kullanan vasküler kontrol mekanizmalarının değerlendirilmesi

Telli myograph teknik vasküler düz kas fonksiyonları ve ekran yeni ilaçlar araştırmak için kullanılır. Biz fare mezenterik arter izometrik contractility ölçme ve vasküler düz kas yeni gevşetici süzmek için detaylı bir protokol raporu.

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

Protokol, farelerden izole edilen mezenterik arterlerin transmural izometrik gerginliğini değerlendirmek için tel miyografi kullanımını açıklar ve endotel hücrelerden ve perivasküler adipoz dokulardan salınan faktörlerin modülasyonunun özel olarak değerlendirilmesidir.

Perivasküler Adipose dokularında modülasyon odaklı Izole mezenterik arterlerin kullanıldığı vasküler ton tepkisini değerlendirmek

Bu protokol, fare aort endotel fonksiyonunun deneysel ex vivo değerlendirmesinde çok odacıklı bir miyograf sistemi kullanılarak tensometrik miyograf tekniğinin kavramlarını ve teknik uygulamasını açıklamaktadır.

Fare Torasik Aortunda Endotele Bağlı Vazogevşemenin Tensometrik Küçük Hacimli Oda Miyografisi ile Ölçülmesi

Ince bağırsak sık sık kan akışını etkileyen ve olumsuz besin emilimini etkileyebilir toksinler maruz kalmaktadır. , Bileşikleri veya ilgi duyulan bir toksin multimyograph ve mezenterik arter ve damar izole kullanarak vazoaktiviteye için taranabilir.

Bir Biyoassay olarak Sığır Mezenterik Arter ve Ven Bölüm yalıtma ve kullanma İnce Barsak vazoaktiviteye için Test

Restenozun inhibisyonu için terapötik bileşiklerin perivasküler verilmesi için bir model test sistemi olarak hizmet etmek üzere neointimal hiperplaziyi indüklemek için farelerin femoral arterinde tel yaralanması oluşturan bir cerrahi tekniği tanımlıyoruz.

Bir Perivasküler Drug Delivery Patch İmplantasyonunda ile Femoral Arter Tel Yaralanma sıçan Modeli

restenoz fare femoral arter yaralanması tel modeli teknik olarak zordur. Bu protokolde başarıyla restenoz çalışmaları için tutarlı neointima ikna etmek tel yaralanması gerçekleştirmek için anahtar teknik detaylar önemlidir göstermektedir.

Arter Restenozun bir fare modeli: Femur Tel Yaralanma Teknik Yönleri

Öğrenin otomatik miyografi yöntemiyle izole mezenterik arterlerde kuvvet ölçümü ve damar reaktivitesi analizi. Bu teknik, fenilefrin ve kalsiyum yanıtlarını değerlendirerek kardiyovasküler araştırmalarda tutarlı sonuçlar sağlar.

Otomatik Tel kasılmaların kâğıda çizilmesi Yüklü daralma ve Rahatlama Çalışmaları

Daha fazla video keşfet