Bir fare beyninde kararlı tek nöron kayıtları için enjekte edilebilir ağ elektroniği

Stereotaksik bir çerçeve üzerinde açıkta kalan bir kafatası ile anestezi uygulanmış bir fare ile başlayın ve cerrahi bir örtü ile örtün.

Beyne erişmek için kafatasında delikler açın ve bir sıkıştırma substratı takın.

Bir şırınga pompasına bağlı bir kılcal iğneyi çerçeveye monte edin.

İğne, giriş/çıkış pedlerine bağlı bir ağ cihazı bölgesi içeren esnek bir yapı olan ağ elektronik problu bir tampon içerir.

İğneyi beynin içine yerleştirin. İğneyi kafatasından çıkana kadar geri çekerken ağ cihazı bölgesini doku içine yerleştirmek için enjekte edin.

İğneyi sıkıştırma alt tabakasının üzerine yerleştirin ve giriş/çıkış pedlerini çıkarın.

Pedleri bir elektronik devre kartına takmak için bükün.

Tamamlanan devreyi doğrulayın ve bağlantıları yalıtın. Nöronların gözenekli ağdan bağlanmasına izin verin.

Devreyi bir veri toplama sistemine bağlayın. Kararlı tek nöron kayıtlarını toplamak için farenin serbestçe davranmasına izin verin.

Ağ elektroniğini bir fare beynine enjekte etmek için, kafatası üzerinde istenen koordinatlarda bir kraniyotomi açmak için bir diş matkabı ve stereotaksik çerçeve kullanın. Paslanmaz çelik bir topraklama vidası veya telin yerleştirilmesi için enjeksiyon bölgesinden uzağa ikinci bir kraniyotomi açın.

Ardından, diş çimentosu ile kafatasına bir sıkıştırma substratı sabitleyin. Alt tabakada yaklaşık 1 milimetre genişliğinde bir kesik, prosedürün ilerleyen aşamalarında katlama adımının güvenilirliğini artırır. Daha sonra, pipet tutucuyu, ağ elektroniği içeren iğne ile dik açılı bir uç kelepçesi kullanarak stereotaksik çerçeveye monte edin. Pipet tutucunun yan çıkışını, 0,5 ila 1 metre uzunluğunda kılcal boru ile bir şırınga pompasına tutturulmuş 5 mililitrelik bir şırıngaya takın.

Ardından, iğnenin ucunu beyinde istenen başlangıç konumuna yerleştirmek için stereotaktik çerçeveyi kullanın. Kamerayı, örgü elektronik probun üst kısmını cam iğne içinde gösterecek şekilde konumlandırın. Şırınga pompasını düşük bir hıza ayarlayarak ve Başlat'a basarak akışı başlatın.

Ağ elektronik probu iğne içinde hareket etmiyorsa akış hızını yavaşça artırın. Ağ elektroniği probu iğne içinde hareket etmeye başladığında, ağ elektronik probunun enjekte edildiği hızda iğneyi geri çekmek için stereotaktik çerçeveyi kullanın ve ağ elektroniğinin işaretli orijinal konumunu kılavuz olarak kullanın.

Tuzlu su akıtmaya devam edin ve iğne kafatasından çıkana kadar iğneyi geri çekin. Ardından, şırınga pompasından gelen akışı durdurun. Bu prosedürde, iğneyi düz, esnek kablo sıkıştırma alt tabakasına ve boşluk boyunca dikkatlice yönlendirmek için stereotaktik çerçeveyi kullanın, ağ elektroniği bağlantılarında bir gevşeklik oluşturmak için çözeltiyi şırınga pompası ile akıtın.

İğne, sıkıştırma alt tabakasının üzerine ve boşluk boyunca olduğunda, ağ elektroniği giriş/çıkış pedlerini sıkıştırma alt tabakasına çıkarmak için akışa daha hızlı bir şekilde devam edin. Deiyonize su pipetinde cımbız kullanarak, giriş/çıkış pedlerini ilk giriş/çıkış pedine mümkün olduğunca yakın 90 derecelik açıyla bükün.

Giriş/çıkış pedleri hizalandıktan, açıldıktan ve ağ gövdesine 90 derecelik bir açıyla yerleştirildikten sonra, hafifçe akan basınçlı hava ile yerlerine kurutun. Sıkıştırma alt tabakasını, giriş/çıkış pedlerinin kenarından yaklaşık 0,5 ila 1 milimetre uzakta düz bir kenarda kesin.

Ayrıca, PCB'ye monte 32 kanallı ZIF konektörüne yerleştirmeyi engelleyecek sıkıştırma alt tabakasının yabancı parçalarını kesin. Ardından, giriş/çıkış pedlerini PCB üzerindeki ZIF konektörüne takın ve mandalı kapatın. Başarılı arayüzü doğrulamak için kanallar ve topraklama vidası arasındaki empedansı ölçmek için ölçüm elektroniğini kullanın.

Empedans değerleri çok yüksekse, ZIF konektörünün mandalını açın, yerleştirmeyi ayarlayın ve başarılı bağlantı onaylanana kadar yeniden test edin. Ardından, ZIF konektörünü kapatın ve açıkta kalan ağ elektroniği, koruma için diş çimentosu ile ara bağlantılar. PCB'yi alt tabakadaki boşlukta çevirin ve PCB'yi çimento ile fare kafatasının üzerine sabitleyin.

Serbestçe hareket eden kayıtlar için, önamplifier PCB'sini taktıktan ve referans vidasını toprakladıktan sonra fareyi sınırlayıcıdan serbest bırakın. Fare serbestçe davranırken veri toplama sistemini kullanarak istenen süre boyunca kayıt yapın.