Zebra Balığı Embriyolarında Motor Nöronların Elektrofizyolojisini İncelemek İçin İnvaziv Olmayan Bir Yaklaşım

Genetik olarak tasarlanmış zebra balığı embriyolarını stereomikroskop altına yerleştirin ve omurilik motor nöronları tarafından tetiklenen spontan kuyruk kıvrılmasını gözlemleyin.

Bu nöronların içsel özellikleri, sodyum kanallarından iyon akışına neden olur, bu da spontan membran depolarizasyonuna ve kaslara yayılan ve kuyruk sargısını tetikleyen aksiyon potansiyellerinin oluşmasına yol açar. Sarma frekansını ölçün.

Sodyum akışını engellemek ve azaltılmış sarma frekansını değerlendirmek için bazı embriyoları bir sodyum kanal blokerine aktarın.

Tedavi edilmemiş embriyoları erimiş agaroza monte edin; hareketi kısıtlamak için agarozun katılaşmasına izin verin ve bir floresan mikroskobu altında gözlemleyin.

Motor nöronlar, donör ve alıcı floroforlara kaynaşmış, zara bağlı voltaj algılama alanına veya VSD'ye sahip bir biyosensörü ifade eder.

Depolarizasyon, VSD konformasyonunu değiştirerek floroforları daha yakın hale getirir.

Uyarılma üzerine, verici enerjiyi alıcıya aktarır ve alıcının floresan emisyonuna neden olur.

Depolarizasyonu inhibe etmek için blokeri ekleyin, bu da alıcı emisyonunu azaltır ve nöronlarda spontan depolarizasyonun bloker aracılı inhibisyonunu doğrular.

Spontan ku