Sıçanlarda Birden Fazla Bölgeden Beyin Aktivitelerinin İn Vivo Elektrofizyolojik Kayıtları

Kafatası açıkta kalacak şekilde stereotaktik bir çerçeveye sabitlenmiş anestezi uygulanmış bir sıçan ile başlayın.

İstenen koordinatları kalibre etmek ve işaretlemek için kafatasındaki referans noktalarını kullanın.

İşaretli yerlerde delikler açın.

Kalıntıları temizleyin ve beynin dış katmanını kesin.

Kurumayı önlemek için delikleri sık sık tuzlu suyla yıkayın.

Elektrotları desteklemek için ek delikler ve ankraj vidaları açın.

Referans elektrotlarını ve elektrofizyolojik kayıt elektrotlarını takın. Akrilik reçine uygulayarak sabitleyin.

Tungsten mikrotel elektrotları beyindeki çok hedefli konumlara göre bir çerçeve üzerine yerleştirin.

Çoklu elektrotlar, birden fazla hedef bölgeden beyin aktivitelerinin aynı anda kaydedilmesine izin verir.

Kafatasındaki referans noktasını kullanarak tungsten mikrotel elektrotları konumlandırın.

Onları nazikçe beynin içine yerleştirin.

Beyin aktivitesini algılamak için kayıt yazılımını yapılandırın.

Elektrotları hedef derinliğe indirin ve veri kaydına başlayın.

Mikroskop altında, belirlenen ucu bregmaya kalibre etmek için standart bir stereotaksik sıçan hizalama aleti kullanın ve alet üzerindeki bregma ve lambda için belirlenen noktalar aynı anda kafatasına değene kadar kesici çubuğu ayarlayın. Kanüllü bir stereotaksik tutucu kullanarak, onu bregmaya kalibre edin ve ardından kafatasındaki tüm matkap deliklerinin konumunu hesaplayın.

Ardından, kafatasını dikkatlice çizerek veya cerrahi bir renk işaretleyici kullanarak açılacak deliklerin konumlarını işaretleyin. Ardından, bir mikro matkap kullanarak, yaklaşık 1 milimetre çapındaki tüm delikleri dikkatlice delin. STN ve SNr için yaklaşık 2 milimetreye 3 milimetre ortak bir delik açın.

İnce bir kanül alın ve iki kanca oluşturmak için ucu bükün. Ardından, matkap deliklerindeki kalıntıları temizlemek için kancaları kullanın ve ortak STN/SNr deliğinde dura materini dikkatlice kesin ve çıkarın. Bundan sonra, matkap deliklerini fizyolojik tuzlu su ile yıkayın.

Beynin ve duranın kurumasını önlemek için matkap deliklerine her 15 dakikada bir damla fizyolojik salin uygulayın. Ardından bir mikro matkap ve uygun paslanmaz çelik mikro vida alın. Bir delik açın ve beyincik üzerindeki referans epidural elektrotların matkap delikleri arasına bir mikro vida vidalayın.

Ardından, elektrot uçlarını ince cımbızla yönlendirin ve doğrudan kafatası kemiğinin altından matkap deliklerine kaydırın. Tüm epidural elektrotları iki bileşenli dental akrilik ile sabitleyin. Bregma noktasını kapatmadığınızdan veya ortak STN/SNr deliğini etkilemediğinizden emin olun.

Ardından, hazırlanan tutucuyu tungsten mikrotel elektrotlarla stereotaksik çerçeveye yerleştirin. En ventral elektrodu, STN'yi hedeflemesi amaçlanan bregmaya kalibre edin. Ortak STN / SNr deliğinin üzerindeki hesaplanan konuma ayarlayın ve elektrotları beyne indirin.

Tungsten mikrotel elektrotların beynin içine düzgün bir şekilde girdiğinden emin olun. Bu prosedürde, bant geçiren filtre gibi bir kayıt yazılımını ayarlayın ve ham veri sinyalini yükseltin. Ardından, uygun ayarlara sahip çevrimiçi bir LFP ve ani artış filtresi kullanın.

Tüm filtreler için Butterworth tipi bir filtre kullanın. Çevrimiçi ani artış sıralaması için bir ani artış eşiği ayarlayın. Çoğu kayıt yazılımı, bir sinyalin yazılım tarafından ani yükselme olarak işaretlendiği eşiğin üzerinde bir genlik değeri olan bir ani yükselme eşiğinin ayarlanmasına izin verir. Ardından, tungsten mikrotel elektrotları yavaşça STN'nin 1 milimetre üzerine indirin ve gerekirse sinyalin stabilize olmasını bekleyin.