JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:08 dk. • July 8th, 2025
Bir perfüzyon odasında bir ağ ızgarası üzerinde havalandırılmış bir yapay beyin omurilik sıvısı veya aCSF'yi perfüze ederek başlayın.
Floresan protein eksprese eden nöronlar içeren bir beyin dilimini aktarın ve platin telli bir cihazla sabitleyin.
Hizalama için kafes ızgarasını döndürün.
Çok kanallı probu dilime doğru indirin.
Floresan protein görselleştirmesi için filtre küpünü ayarlayın.
Probu hizalamak için dilimi döndürün.
Doku yüzeyinin altındaki prob yüksekliğini ayarlayın.
Şimdi, aCSF'yi perfüze edin ve floresan olarak işaretlenmiş nöronlara odaklanın.
Yüksek güçlü bir objektif kullanarak dokuya odaklanın ve uyarma ışığını ayarlayın.
Nöronlardaki floresansı gözlemlemek için uygun bir ışık filtresi kullanın.
Yama pipeti için alan yaratmak ve pozitif basınç uygulamak için objektif lensi ayarlayın.
Ardından, bir zar çukuru oluşturmak için pipeti nöronun yakınına yerleştirin.
Son olarak, bir zar sızdırmazlığı oluşturmak için zayıf emme uygulayın, ardından zarı kırmak ve hedeflenen nörondan elektrik kayıtları elde etmek için güçlü emme uygulayın.
Çok kanallı probu ex vivo beyin dokusu slaytına yerleştirmek için, kabarcıklı deneysel ACSF'yi dakikada üç ila altı mililitre perfüze e
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin