Tüm Hücre Yama Kelepçesi Kullanarak Kisspeptin Nöronları Üzerinde Test Büyüme Hormonu Etkisinin Belirlenmesi

Transgenik bir fare hipotalamik dilimini aCSF ile perfüze edilmiş bir kayıt odasına sabitleyin.

Dilim, üreme sistemi regülasyonu için çok önemli olan floresan füzyon proteini eksprese eden kisspeptin nöronları içerir.

Dahili bir çözeltide bir kayıt elektrodu içeren bir mikropipet monte edin.

Mikroskobik olarak bir floresan kisspeptin nöronunu bulun.

Pipete pozitif basınç uygulayın ve hedef nörona doğru ilerletin. Temas halinde, basınç nöronal zar üzerinde bir girinti oluşturur.

Mikropipet ile membran arasında yüksek dirençli bir conta oluşturarak kısa bir negatif basınç uygulayın.

Doğru ölçümler için tutma voltajını nöronun fizyolojik dinlenme potansiyeline ayarlayın.

Zarı kırmak için kısa negatif basınç darbeleri uygulayın ve tüm hücre konfigürasyonu oluşturun.

Parametreleri izleyerek nöronun canlılığını onaylayın.

Sinyal yollarını tetikleyen ve nöronun zar potansiyelinde değişikliklere neden olan bir test büyüme hormonu tanıtın.

Büyüme hormonunun nöronal aktivite üzerindeki inhibitör etkisini belirlemek için zar potansiyelindeki değişiklikleri ölçün.

İlgilendiğiniz bir beyin dilimini akrilik bir transfer pipeti kullanarak kayıt odasına teker teker aktarın. Dilimi, aCSF perfüzyonu