Fare Beyninin Her İki Yarımküresinden Yerel Alan Potansiyelinin Kaydedilmesi

Kafası stereotaktik bir çerçeveye sabitlenmiş anestezi uygulanmış bir fare ile başlayın.

Saç derisini tıraş edin ve sterilize edin.

Bir kesi yapın ve kafatasını ortaya çıkarmak için kalan dokuyu çıkarın.

Kafatasını bir dezenfektanla temizleyin ve hedef yerlerde delikler açın.

Beynin dış tabakasını çıkarın.

İyonik bir çözelti ile doldurulmuş mikroelektrotları deliklere istenen açıda yerleştirin.

Her iki mikroelektrotu da beynin hedef koordinatlarına indirin.

Elektrotların direncini test edin ve yerel alan potansiyelinin veya LFP verilerinin güvenilir bir şekilde elde edilmesini sağlamak için kayıt ayarlarını yapın.

LFP, küçük bir bölgedeki birçok nöronun kolektif aktivitesinden kaynaklanan voltaj değişikliklerini yansıtır.

Aralarındaki nöral aktiviteyi karşılaştırmak için her iki yarım küreden LFP'leri kaydedin.

Ameliyattan önce, forseps ile bir kuyruk veya ayak parmağı çimdikleme yaparak farenin anestezi derinliğini onaylayın. Ardından, fareyi stereotaksik bir aparata yerleştirin ve kafasını sabitleyin. Nemli tutmak için her iki gözünüze de merhem sürün.

Ardından kafayı tıraş edin ve bölgeyi sterilize edin. Tıraşlı bölgenin ortasında 12 ila 15 milimetrelik küçük bir kesi yapın. Forseps kullanarak, kafa derisini nazikçe orta hattan uzaklaştırın. Daha sonra cildi nazikçe ayırın ve kalan dokuyu çıkarın.

Hidrojen peroksit kaplı pamuklu çubuklar kullanarak kafatasını temizleyin. Stereomikroskop altında, kayıt mikroelektrotlarının M2 bölgelerine yerleştirilmesine izin vermek için kafatasının hem sol hem de sağ tarafında 1 ila 1,5 milimetre yarıçaplı iki küçük delik açın.

Dura mater'i bir tungsten iğnesi ile dikkatlice çıkarın, ardından mekanik mikromanipülatörler kullanarak 60 derecelik bir açıyla deliklere 0,5 molar sodyum klorür ile doldurulmuş iki ayrı kayıt mikroelektrodu yerleştirin.

LFP kaydı için sol ve sağ cam elektrotları yavaşça M2 koordinatlarına indirin. Kalite kontrol için, diferansiyel amplifikatörü kullanarak her elektrotun direncini test edin. Ardından, kayıt işlemini 0.1 kez amplifikasyon ile 1,000 Hertz yüksek geçiş ve 1,000 Hertz düşük geçiş olarak ayarlayın. Sayısallaştırılmış ham LFP verilerini, fare anestezi altında saniyede iki nefeste eşit şekilde nefes alarak en az 60 saniye boyunca kararlı durumda toplayın.