Uzun Süreli İnkübasyondan Sonra Bir Fare Beyin Diliminde Nöral Aktivitenin Ölçülmesi

0 görüntüleme2:55 dk • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Uzun süreli inkübasyondan sonra oksijenli aCSF ile perfüze edilmiş bir fare beyin dilimini bir kayıt odasına sabitleyin.

Dilimdeki hücreler, hücre içi kalsiyum ölçümlerini kolaylaştıran bir kalsiyum indikatörü ile yüklenir.

Elektrolit çözeltisinde bir elektrot içeren bir kayıt pipeti alın.

Bir hedef nöron belirleyin. Kayıt pipetini hücre zarına pozitif basınçla yerleştirin ve bir çukur oluşturun.

Sıkı bir sızdırmazlık oluşturmak için negatif basınç uygulayın.

Ayrıca, negatif basınç darbeleri uygulayın, zarı yırtın ve tam hücre konfigürasyonu oluşturun.

Nöronun zarını depolarize eden yüksek potasyum konsantrasyonuna sahip perfuse aCSF.

Depolarizasyon, sodyum kanallarını açarak bir aksiyon potansiyelini tetikler, bu da voltaj kapılı kalsiyum kanallarını aktive eder ve kalsiyum akışına izin verir.

Kalsiyum iyonları göstergeye bağlanarak uygun aydınlatma altında görselleştirilebilen floresansı artırır.

Potasyum uygulamasını takiben kalsiyum akışının neden olduğu hücre içi floresanstaki artış, uzun süreli inkübasyondan sonra nöronal canlılığı gösterir.

Kayıt için, dokuyu mikroskop altında batık bir kayıt odasına yerleştirin ve dakikada 4 ila 5 mililitre akış hızında oksijenli aCSF ile perfüze edin. Özel yapım bir arp kullanarak dokuyu içeride tutun. Ardından, 5 ila 6 mega ohm'luk bir nihai direnç elde etmek için bir mikropipet çektirme kullanarak bazı kayıt pipetleri hazırlayın.

Pipeti 3 ila 4 mikrolitre iç solüsyonla doldurun ve ardından solüsyonu buzun üzerine yerleştirin. Ardından, IR-DIC altında bir CCD kamera kullanarak hücreleri görselleştirin. Bir mikromanipülatör kullanarak pipeti hücre zarının üzerine yerleştirin. Pipet tutucusundaki bir emme portu aracılığıyla pozitif basıncı koruyun. Pipet hücrenin üzerine geldiğinde, gigaohm'luk bir sızdırmazlık elde etmek için pipete hafif bir negatif basınç uygulayın.

Ardından, hücre zarını kısa bir negatif basınçla yırtın. Ardından, tam hücre akımı veya voltaj kelepçesi kaydını başlatın. Akış 4'ün tek bir uyarma dalga boyu için, uyarma ışığını 460 ila 490 nanometre bant geçiren bir filtreden ve yayılan ışığı 515 ila 550 nanometre bant geçiren filtreden filtreleyin.

11:26

Ratiometric kalsiyum görüntüleme Caenorhabditis Elegans davranışlar içinde bireysel nöronların

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:07

Xenopus laevis'te Nöronal Öncül Karakterizasyonu için Floresan Kalsiyum Görüntüleme ve Daha Sonra Yerinde Hibridizasyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:27

Tadı Uyaranlara Fare Genikül Ganglion Nöron Yanıtlarının In vivo Kalsiyum Görüntülemesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

03:46

Fare Omurilik Dilimlerinde Nöronal Ağların Mikroelektrot Dizisi Tabanlı Değerlendirmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

03:10

Fare Beyni Kortikal Dilimlerinde Spontan ve İsteğe Bağlı İktal Olayların Üretilmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:39

Fare Beyin Dilim Hazırlık içinde nöbet benzeri Faaliyet doğrudan akım Stimülasyon ve Multi-elektrot Dizi Kaydı

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:53

En iyi duruma getirilmiş bir Nkullanarak akut beyin dilimleri hazırlanması-metil-D-glucamine koruyucu kurtarma yöntemi

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:30

Elektrofizyoloji ve Kalsiyum-görüntüleme için akut nöronal Doku Uzamış İnkübasyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:24

Kayıt ve modülasyon Epileptiform aktivite elektrot dizilerin birleştiğinde kemirgen beyin dilimleri içinde

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:26

Yüksek frekanslı stimülasyon tarafından fare dentat Gyrus aktivasyonu için invaziv bir yöntem

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 1 Ağustos 2026