Anestezi Uygulanmış Bir Sıçanda Eş Zamanlı Elektroensefalografik ve Lokal Alan Potansiyeli Kayıtları

Anestezi uygulanmış bir fareyi, kafatası açıkta kalacak şekilde stereotaksik bir çerçeveye sabitleyin.

Sıçanın kafatasında dura delinmiş bir çapak deliği, bir boyun kesisi ve bıyık pedlerine bağlı uyarıcı elektrotlar vardır.

Kafatasına iletken macun bulaşmış bir elektroensefalogram veya EEG, örümcek elektrodu sabitleyin ve çapak deliğini açık tutun.

Örümcek elektrot, altındaki kortikal alandan gelen genel nöronal aktiviteyi yansıtan yüzey EEG'sini ölçer.

Doğrusal çok kanallı bir mikroelektrodu bir mikromanipülatör üzerine monte edin.

Mikroelektrotu çapak deliğinden 1500 mikrometre derinliğe kadar serebral kortekse yerleştirin.

Mikroelektrot, kortikal nöronal aktiviteyi yansıtan yerel alan potansiyelini veya LFP'yi ölçer.

EEG ve LFP referans elektrotlarını boyun kesisinin içine yerleştirin.

Kayıt ve referans elektrotlarını bir ön amplifikatöre bağlayın.ampbir veri toplama ünitesine bağlı.

Bıyık pedlerine elektriksel uyaranlar uygulayın ve uyarılmış LFP genliğini en üst düzeye çıkarmak için mikroelektrot derinliğini ayarlayın. Birlikte lokalize EEG ve LFP sinyallerini kaydedin.

Bu prosedürde, çapak deliğini çevreleyen kafatasını pamuklu bir bez kullanarak temizleyin ve kurulayın. İletken EEG macununu bir EEG örümcek elektrodunun düz bir tarafına dikkatlice uygulayın. Multilaminer bir mikroelektrotun macun ve örümcek elektrot ile temas etmeden delikten geçmesine izin vermek için örümcek elektrot üzerinde EEG macunundan küçük bir delik açın.

Örümcek elektrodu, kafatasındaki çapak deliği ile EEG macunu kafatasına bakacak şekilde hizalayın. Örümcek elektrodu kafatasının üzerine dikkatlice bastırın ve EEG macunu ile kafatası ile sıkı bir temas sağlayın.

Bir şırınga üzerindeki bir iğne kullanarak çapak deliğini gizleyen herhangi bir macunu çıkarın ve örümcek elektrotun çevresinin ötesindeki aşırı EEG macununu çıkarın, böylece örümcek elektrot ile kafatası arasındaki temas mekansal olarak elektrotun boyutuyla sınırlandırılır. Daha sonra, EEG için referans elektrot üzerine EEG macunu sürün ve sıçanın boynunun arkasındaki insizyonun içine güvenli bir şekilde yerleştirin.

Ardından, EEG elektrotlarını düşük empedanslı sinyaller için pasif bir sinyal ayırıcı aracılığıyla ön amplifikatöre bağlayın. Bu aşamada, beş kiloohm'un altında olduğundan emin olmak için EEG probunun direncini test edin. Değilse, daha fazla EEG macunu ekleyin ve örümcek elektrodun kafatası ile iyi bir temas sağladığından emin olun.

Daha sonra, stereotaktik çerçeveye bir mikromanipülatör kolu monte edin. Doğrusal 16 kanallı bir mikroelektrodu, mikromanipülatör koluna güvenli bir şekilde tutturulmuş 16 kanallı bir akut kafa aşamasına bağlayın. Ardından, EEG macununu mikroelektrot için referans elektrot üzerine sürün ve ardından EEG için referans elektrotun yanındaki insizyonun içine güvenli bir şekilde yerleştirin. Mikromanipülatör kolunun açısını, mikroelektrot kortikal yüzeye dik olacak şekilde ayarlayın.

Şimdi, mikroelektrotu bir mikroskop altında indirin, böylece mikroelektrotun ucu, en üstteki elektrot kortikal yüzeye nüfuz edene kadar çapak deliğinin altındaki küçük açıklığa hedeflenir. Elektrodu kıracağı için mikroelektrodu dura yüzeyine zorlamamak için özen gösterilmelidir.

Mikroelektrodu 1500 mikrometre derinlikte kortikal yüzeye yerleştirin. Bıyık pedine bir uyaran dizisi uygulayarak ve bir PC monitöründe 16 kanallı uyarılmış LFP'yi gözlemleyerek derinliği mikro düzeyde ayarlayın. Mikromanipülatör üzerindeki z ekseni düğmesini, uyarılan LFP'nin en yüksek genliği meydana gelene kadar dikkatlice çevirin, çünkü bu korteksteki katman 4 ile çakışır.