JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:41 dk. • July 8th, 2025
Bir kayıt odasında hareketsiz hale getirilmiş bir beyin dilimi ile başlayın.
Bir mikroskobun kamera kontrollü yazılımını kullanarak hedef alana odaklanın
Uyarma ışığını açın ve farklı derinliklerde birden fazla fotoğraf çekin.
Yazılım, floresan etiketli hücrelerin koordinatlarını algılar.
Şimdi, kayıt elektrodunu içeren çözelti dolu yama pipetini hazneye yerleştirin.
Konum kontrollerini kalibre etmek için uygun yazılımı kullanın.
Yüksek büyütme altında, floresan etiketli hücreyi hassas bir şekilde hedeflemek için kontrolleri yeniden kalibre edin.
Hedef hücrenin koordinatlarını seçin.
Yama pipetinin otomatik olarak indirilmesini başlatın.
Bilgisayar, elektrot aracılığıyla direnci izler. Negatif bir basınç uygulayın, pipetin hücre zarı ile temasından dolayı direncin artması gigaseal oluşumunu gösterir.
Bunu takiben, yazılım hücre zarını delmek ve tam hücre yama konfigürasyonu elde etmek için basıncı daha da azaltır.
Bu adımda, kayıt odasının ortasına bir beyin dilimi yerleştirin. Beyin dilimini bir dilim oyuk veya arp ile stabilize edin. Floresan hücreyi tespit etmek için, dört kat büyütme altında ilgilenilen alanı bulun. Ardından, "taşımak için tıkla" modunu açarak mikroskop sahnesi
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin