JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:43 dk. • July 8th, 2025
Kültür ortamında serebral vasküler endotel veya CVE hücreleri ile başlayın.
CVE hücreleri, beynin kan damarlarını kaplayan ve beyin fizyolojisi için gerekli olan yüksek enerji gerektiren hücrelerdir.
Hücreleri hücre dışı bir akı hücre kültürü plakasına yerleştirin. Hücre bağlanması için kuluçkaya yatırın.
Kültür ortamını, istenen pH'a sahip hücre dışı akı test ortamı ile değiştirin.
PH'ı korumak için karbondioksit olmadan inkübe edin.
Ardından, sensörler ve bir alt plaka içeren bir hücre dışı akı sensörü kartuşu alın.
Plakaya bir kalibrasyon çözeltisi ekleyin ve sensörleri nemlendirmek için karbondioksit olmadan inkübe edin.
Bu sensörler, mitokondriyal aktivitenin göstergesi olan hücre dışı ortamdaki oksijen konsantrasyonundaki değişiklikleri ölçebilir.
Ardından, kartuşu bir biyoanalizör makinesine yükleyin ve sensörleri kalibre edin.
Alt plakayı, hücreleri içeren plaka ile değiştirin.
CVE hücrelerinin mitokondriyal fonksiyonunu ölçün.
Uygun sayıda alt kültürden sonra, 1.6 x 104 hücreyi, oyuk başına 80 mikrolitre tam ortamda, 96 oyuklu bir hücre dışı akı hücre kültürü plakasına tohumlayın ve plakayı% 5 karbondioksit içeren 37 santigrat derece inkübatöre yerleştirin.
Mitokondriyal f
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin