Nöbet İndükleyici Ajanlara Yanıt Olarak Beyin Korteksinin Çok Elektrotlu Bir Dizi ile İzlenmesi

Anterior singulat korteks veya ACC ve talamus bölgelerini içeren bir beyin dilimi ile başlayın.

Bir çapa kullanarak, beyin dilimini oksijenli yapay beyin omurilik sıvısı ile perfüze edilmiş bir elektrik sinyali ölçüm cihazı olan çok elektrotlu bir diziye veya MEA odasına sabitleyin.

Transkraniyal doğru akım stimülasyonunu veya tDCS elektrotlarını, beyin dilimine doğru akım iletmek için biri ACC'nin yakınına ve diğeri ACC'nin distaline yerleştirilecek şekilde konumlandırın.

Temel sinyalleri kaydedin ve tDCS aracılığıyla dilime elektrik akımı iletin.

Kaliteli sinyaller elde etmek için elektrot uzunluğunu ve tDCS akımını ayarlayın.

Uyarıcı bir elektrot kullanarak, talamusa akım darbeleri iletin, bu da ACC'yi uyararak yapay nöbeti indükler.

Optimal bir ACC yanıtı elde etmek için talamusu ACC'ye bağlayan talamus-singulat yolunu uyarmak için akımı ayarlayın.

MEA aracılığıyla kaydedin.

Nöbete neden olan ilaçları MEA odasına infüze

Uyarıcı elektrotlar kullanarak, talamus-singulat yoluna elektrik darbeleri verin ve ilaca bağlı ACC yanıtını kaydedin.

Çok kanallı sisteme bir MEA probunun yerleştirildiğini onaylayın. ACSF'yi MEA odasına yönlendirmek için bir tüp ve ACSF'yi odadan çıkarmak için diğer tüpü kullanın. Preparatı 30 santigrat derecede ılık oksijenli ACSF ile sürekli olarak perfüze edin. Islak bir pamuklu çubuk kullanarak, bir beyin dilimini MEA'ya aktarın.

ACC'yi elektrotların üzerine yönlendirmek için beyin dilimini dikkatlice hareket ettirin. Ardından, dilim ve elektrotlar arasında iyi bir elektrik bağlantısı sağlamak için beyin dilimini bir dilim ankrajı ile stabilize edin. Daha sonra, anot elektrodunu ACC'nin proksimaline ve katot elektrodunu ACC'nin distaline yerleştirin. MEA'nın iki alan oryantasyonuna göre alan gücünü kaydedin. Ardından, bir stimülatör kullanarak elektrik akımlarını verin.

İki gümüş klorür elektrotu arasındaki mesafeyi yaklaşık 1,5 ila 2 santimetreye ayarlayın ve DCS'yi 0,5 ila 2 miliamper arasında yapmak için stimülatörün akım gücünü ayarlayın. Bu prosedürde, MT'ye bir tungsten elektrot yerleştirin ve stimülatörden dilimin talamik bölgesine darbeler verin. Ardından, bir ACC yanıtı ortaya çıkaran eşiği belirlemek için çeşitli akım yoğunluklarını kullanın.

Optimum yanıt profilini elde etmek için tungsten elektrodu talamo-singulat yolu boyunca hareket ettirin. 10 ila 20 ACC yanıtı kaydedin ve boş stimülasyonla uyandırılan tüm ACC yanıtlarının otomatik olarak ortalamasını almak için yazılımı kullanın.

Nöbet benzeri aktiviteyi indüklemek için, perfüzyon çözeltisine AP için 250 mikromolar ve 5 mikromolar bikükülin ekleyin ve dilimi 2 ila 3 saat perfüze etmeye devam edin. Pompayı nispeten hızlı bir perfüzyon hızında tutun, bu da pH gradyanının birikmesini önlemeye yardımcı olabilir. Ardından, tungsten elektrodu MT'ye yerleştirin ve bir ACC yanıt profili elde etmek için elektriksel stimülasyon sağlayın. 10 ila 20 tarama kaydedin ve yanıtların ortalamasını alın. Daha sonra, ilaçları yıkamak için perfüzyon solüsyonunu taze ACSF ile değiştirin.