Sinaptik Ko-Kültürlerde Ventral Hipokampal Aksonlar Boyunca Nikotin Kaynaklı Kalsiyum Sinyalinin Görüntülenmesi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:11 dk. • July 8th, 2025
Fare ventral hipokampus dilimlerinin ve nucleus accumbens nöronlarının genetik olarak değiştirilmiş ko-kültürlerini bir lamel üzerinde alın.
Hipokampal nöronlar, nikotinik asetilkolin reseptörlerini aşırı eksprese eden pre-sinaptik akson terminallerini yansıtır ve post-sinaptik çekirdek accumbens nöronları ile sinapslar oluşturur.
Nöronlar, hücre içi kalsiyum ölçümleri için bir kalsiyum indikatör boya ile yüklenir.
Lameli kalsiyum iyonları içeren tampon ile perfüze edilmiş konfokal bir mikroskop odasına aktarın.
Kontrol olarak hipokampal aksonal projeksiyonların floresan görüntülerini yakalayın.
Hipokampal nöronlar üzerindeki nikotinik asetilkolin reseptörlerine bağlanan ve kalsiyum akışını tetikleyen perfuse nikotin.
Kalsiyum iyonları hücre içi boyaya bağlanarak floresansı arttırır.
Hipokampal aksonlar, nucleus accumbens nöronlarında sinaptik iletimi başlatan uyarıcı nörotransmiterler salgılar.
Nikotini çıkarmak için tampon ile yıkayın.
Zamanla, nikotinik asetilkolin reseptör aktivasyonu, hücre içi depolardan kalsiyum salınımına neden olur, bu da boya floresansının artmasına neden olur ve ventral hipokampal aksonlar boyunca sürekli kalsiyum sinyalini gösterir.
Kültürleri teker tek
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin