JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:41 dk. • July 8th, 2025
Anestezi uygulanmış, genetiği değiştirilmiş bir Drosophila melanogaster'ı yan tarafına bir lamel takın.
Ön ayaklarını uzatın ve tarsal segmentleri ortaya çıkarmak için sabitleyin.
Bu segmentler, kalsiyuma bağlı formda floresan veren kalsiyum indikatör komplekslerini eksprese eden tat nöronlarına sahiptir.
Çözeltiyi korumak için sineğin etrafına hidrofobik bir bariyer çizin.
Sineğin iyileşmesine izin verin ve nemlendirmek için açıkta kalan tarsal segmentlerin üzerine tamponlu bir tuzlu su çözeltisi yerleştirin.
Konfokal bir mikroskop altında, tarsal segmentleri gözlemleyin ve bir ön stimülasyon floresanı elde etmek için tat nöronlarını çeşitli derinliklerde görüntüleyin.
Segment üzerine lipofilik ligandlar içeren bir stimülasyon çözeltisi ekleyin.
Bu ligandlar, tat alma nöron reseptörlerine bağlanarak sinyal yollarını başlatır ve kalsiyum kanallarının açılmasını tetikler.
Bu, hücre dışı sıvıdan gelen kalsiyum iyonlarının sitoplazmaya girmesine ve kalsiyum gösterge komplekslerine bağlanmasına izin vererek floresan emisyonuna neden olur.
Tekrar gözlendiğinde, nöronal floresansta bir artış, ligand'a nöronal fizyolojik tepkiyi doğrular.
Sineği uyuşturduktan sonra, çok küçük bir damla şe
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin