JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:54 dk. • July 8th, 2025
Işığa bağımlı iyon kanallarını ifade eden embriyonik böbrek hücrelerini ve bir floresan raportör proteini içeren bir lamel silikon uygulanmış bir ölçüm odasına yerleştirin. Kapatın ve harici bir arabellek ekleyin.
Bu odayı mikroskop altına yerleştirin. Agar ile doldurulmuş bir banyo elektrodu yerleştirin. Artık ortamı ve ölü hücreleri çıkarmak için bir tampon ile perfüz.
Bir floresan filtresi kullanarak hedef hücreyi tanımlayın ve ona odaklanın.
Bir mikromanipülatöre bir yama pipeti takın. Tıkanmayı önlemek için baskı uygulayın ve hücreye yaklaşın.
Pipeti hücrenin yakınına yerleştirin ve uçta bir zar yaması oluşturmak için pozitif basıncı serbest bırakın.
Membran yamasını oluşturduktan sonra, zarı yırtmak için negatif basınç uygulayın.
İyon kanallarını açmak için belirli bir dalga boyunda bir ışık uygulayın. İyonların hareketi elektrot tarafından voltaj değişimi olarak kaydedilir.
Başlamak için, harici tamponun sızmasını önlemek için ölçüm odasını silikonla kapatın. Ardından, hazneye bir lamel yerleştirin ve kapatın. Hücrelerin ayrılmasını önlemek için hazneyi hücre dışı tamponla dikkatlice doldurun. Ardından, hücre görselleştirme için 40x objektifi kullanarak ölçüm odasını mikrosk
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin