JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:47 dk. • April 28th, 2025
Etrafında bant bulunan bir cam slayta sabitlenmiş parçalanmış bir Drosophila embriyosu ile başlayın.
Sineğin motor nöronları görselleştirme için floresan olarak etiketlenmiştir.
Mikroskop kullanarak embriyoyu görselleştirin ve embriyonun yanına yeşil floresan lipofilik boya dolu bir mikropipet yerleştirin.
Ardından, floresan moduna geçin ve motor nöronun kas kavşağında motor nöronun aksonal ucunu bulun.
Parlak alan moduna geçin, hedef aksonun ucunu pipetle temas ettirin, bir boya damlası bırakın ve ardından inkübe edin.
Lipofilik yapıları ve aksonal çevreleri nedeniyle, boyalar hedeflenen aksonun lipid açısından zengin zarına seçici olarak girer.
Zamanla, boya geriye doğru hareket eder, aksonal lipid çift tabakası boyunca nöronal gövdeye doğru geriye doğru hareket eder ve nöronal çıkıntıları etiketler.
Bandı slayttan çıkarın ve bir lamel yerleştirin.
Slaydı konfokal mikroskop altında gözlemleyin.
Retrograd etiketli hedef nöron, ayrıntılı nöronal morfoloji ve projeksiyonları gösteren yeşil floresan renkte görünür.
Embriyonun iç dokularına zarar vermemeye dikkat ederek, embriyoyu vitellin zarından banttan camın üzerine sürüklemek için diseksiyon mikroskobu altında bir cam iğne kullanın.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin