Floresan Ömür Boyu Görüntüleme Mikroskobu Kullanılarak Bir Doku Bölümündeki Amiloid Yapılarının Analiz Edilmesi

Anormal protein birikintilerini temsil eden amiloid agregatları olan bir doku kesiti alın.

Doku, spesifik olarak amiloid fibrillerin beta-tabaka yapılarına bağlanan floresan boya heptamer-formil tiyofen asetik asit veya hFTAA ile boyanır.

Boya moleküllerinin floresan ömrünü ölçen bir floresan ömür boyu görüntüleme mikroskobu ünitesi ile donatılmış bir konfokal mikroskop kullanarak slaydı görüntüleyin.

Boya moleküllerinin etkili bir şekilde uyarılması için mikroskop ayarlarını optimize edin.

Lazer ışığı dokuyu aydınlattığında, hFTAA uyarılır ve floresan verir.

Kompakt yapılarda daha güçlü boya bağlanması daha uzun kullanım ömrüne neden olurken, daha az kompakt yapılarda daha zayıf boya bağlanması daha kısa kullanım ömrüne yol açar.

Daha sonra, yazılım toplamın renk kodlu bir görüntüsünü oluşturur.

Kırmızı ve sarı gibi renkler, daha az kompakt, kararsız amiloid yapıları yansıtan daha kısa floresan ömürlerini gösteren çevrede görünür.

Çekirdekteki mavi ve yeşil gibi renkler daha uzun floresan ömürlerini temsil ederken, daha kompakt ve kararlı amiloid yapıları yansıtır.

Boyama gününde, bölümleri her seferinde 10 dakika boyunca ardışık %99 etanol, %70 etanol, dH_2O ve PBS banyolarına daldı